高亲和力gst 纯化介质gst 融合蛋白纯化试剂盒 - 金斯瑞.pdfVIP

高亲和力GST 纯化介质 GST 融合蛋白纯化试剂盒 产品描述 高亲和力GST 纯化介质（产品编号：L00206），适用于一步纯化GST 融合蛋白和其他由 大肠杆菌系统、昆虫细胞和哺乳动物细胞系统表达的 GST 重组蛋白。使用高亲和力 GST 纯 化介质，可以直接从预处理细胞裂解液中纯化重组 GST 融合蛋白，它是高效纯化的最佳选 择。高亲和力GST 纯化介质的主要特点见表1。 表1： 柱体积 10 ml （20 ml 50%的悬浊液） 配体 谷胱甘肽 动态吸附量 35-45 mg GST 标签蛋白（26 kDa ）/ml 介质 球形基质 4 %交联度琼脂糖 平均粒径 90 μm （45 ‐165 μm） 储存溶剂 1 × PBS （含20%乙醇） 储存稳定性 2 ‐8℃储存18 个月 金斯瑞同时提供GST 融合蛋白纯化试剂盒（产品编号：L00207）和蛋白表达及纯化试剂 盒（产品编号：L00208），它们是高亲和力GST 纯化介质的衍生产品，能够提供更便捷的蛋 白表达和纯化实验操作。上述三种产品的组分见表2 。 表2： 组分 L00206 L00207 L00208 高亲和力GST 纯化介质 10 ml 10 ml 10 ml 重力柱 5 5 还原性谷胱甘肽 5 x 0.154 g 5 x 0.154 g N/A 肠激酶 2 x 100 IU N/A 表达载体 pGS-21a 纯化步骤 制备细胞裂解液 1 4 ℃离心10 分钟（3000 g ）收获细胞，弃上清。 2 用冷1×PBS 重悬细胞（每50 ml 细胞培养基所需3 ml 冷1× PBS），4 ℃离心10 分钟（3000 g ）收获细胞，弃上清。 3 将细胞置于-80 ℃冷冻1 小时（如果不立刻进行试验，也可以直接置于-80 ℃保存）。 4 在冰上解冻细胞，用步骤 2 中同样量的冷1 ×PBS 重悬细胞。如果需要，可加入适量的 添加剂，如非离子去污剂（NP-40）或蛋白酶抑制剂（PMSF）等。 5 用超声波破碎法在冰上破碎细胞，直到样品不再是粘性则破碎完全。 6 4 ℃离心10 分钟（12,000 g），并小心将上清（可溶组分）转