荔枝胚蛋白质的提取方法 - 热带亚热带植物学报.pdfVIP

热带亚热带植物学报 2003，l1(2)：l7 l76 Jbzl丌lnfofTropicalandSubtropcialBotany 荔枝胚蛋 白质 的提取方法 张 以顺 向 旭 2 黄上志 傅家瑞 (1．中山大学生命科学学院，广东广州510275；2．广东省农业科学院果树研究所，广东 广州 51o64o) 摘要 ：以不同体积的Tris—HCI(O．1moFL,pH8．8)为提取液 ，结合不同含量 (以胚鲜重计)的PVP40，对怀枝 、黑叶和桂味等 荔枝 (Litchichinensis)品种 的胚蛋 白质进行提取 。结果表 明，提取液体积为胚鲜重 的5倍(ml FW)，并加入 15％的 Pv】P4O时，提取蛋 白质的效果最好，可用于荔枝胚可溶性蛋 白质含量 的测定 ；胚乳蛋 白质的提取则 以等体积的提取液 (内含2％的PW 4O)为佳。加入 10％PVP40的胚蛋白提取液可直接进行 SDS电泳 ，用 l0倍于蛋 白质提取液体 积 的乙醇沉淀胚和胚乳的蛋 白提取液，可得到最佳的SDS电泳效果 。 关奠词 ：荔枝 ；胚蛋 白质：P~ 40：电泳 中固分类号 ：Q946．1 文献标识码：A 文章编号 ：1005-3395(2003)02—0174—03 A M ethod forExtractingEmbryoProteinsin LitchichinensisSonn． ZHANG Yi．shun XIANG Xu HUANG Shang．zhi FtlJia．rui (1．L ScienceCollege，踟 n hm Uniters讧y，Guangzhou510275，chil1a；2．PomologyInstitute， C,,,,,eaongAcademyofAgriculturd Siences，Guangzhou510640。China) Abstract：DifferentvolumesofTris-HClbuffer (0．1mol／L，pH 8．8) incombinationwithdifferentcontnetsof PVP40 were employed to studythe embryo proteni extracted from Litchi chinensisvarieties “Huaizbi”， “Guiwei”and “Heiye”． Itwasshownhtathtevolmu eofTris-HClbufferbeing5timeshte蕾 shwieghtof embryonadaddedwiht 15％PVP40(gg。FW)Wasadaptedtoobtainasatisfactoryresult．Homogneatecontaining 15％PVP40(gg。FW)couldbeuseddirectlyfordeterminationofsolubleprotenicontentbyCoomassieBrillinat BlueG一250nad10％ PVP40 (gg。FW) forsodimu dodecylsulfate—polyacrylamidegelelectrophoresis (SDS—PAGE)． Endosperm proteincouldbeextractedwiht equalvolmu eofTris—HCIcontaining2％PVP40． Pr~ipiattionofembryonadendosperm proteniswiht ehtna olof10timeshtevolmu eofproteni extractiongave bestSDSpattern． Key words：Litchichinensis；Embryoproteni：PVP40；Elcctrophoresis 荔枝 (LitchichinensisSonn．)原产我 国，是南 泳效果。陈伟等[21用含有三氯醋酸和 B一巯基乙醇的 方典型的亚热带水果，也是顽拗性植物 的代表。荔 预冷丙酮在-20~C下浸提荔枝胚与 PVP的研磨粉来 枝胚的发育状况可分为正常型、败育型和部分败育