4薄层色谱的基本操作.PDF

(Column chromatography and TLC) 实验2 ：薄层层析与柱层析 一、薄层色谱—偶氮苯与苏丹Ⅲ的分离 (TLC— the separation of azobenzene and Sudan III) Copyright © 2014 Dr. Qiang Liu 102 1. 实验目的 了解薄层色谱的原理和分离方法  熟练掌握薄层色谱的分离技术及操作方法 瓶盖 展开瓶 2. 实验原理 硅胶板 用毛细管将待测样品点于硅胶板上 （固定 相 ），在层析缸中用适当极性的有机溶剂 溶剂前沿 作为展开剂 （流动相 ）进行展开。利用各 组份在展开剂中的溶解能力和被吸附剂吸 点样点 附能力的不同 ，最终将各组份分开。 溶剂(展开剂) 比移值（R 值）：表示物质移动的相对距离 f 溶质的最高浓度中心至原点中心的距离 薄层色谱系统组成 R f 溶剂前沿至原点中心的距离 Copyright © 2014 Dr. Qiang Liu 103  固定相——吸附剂 硅胶H——不含粘合剂 硅胶G——含锻石膏粘合剂 硅胶 硅胶HF254——含荧光物质 固定相 硅胶GF254——含锻石膏粘合剂和荧光物质 氧化铝 Copyright © 2014 Dr. Qiang Liu 104  流动相——溶剂(洗脱剂或展开剂) 己烷和石油醚 环己烷 四氯化碳 三氯乙烯 二硫化碳 甲苯 苯 二氯甲烷 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 丙醇 乙醇 甲醇 水 吡啶 乙酸 展开剂的选择条件： ①对样品有良好的溶解性； ②待测样品的R 在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间； f ③不与待测组分或吸附剂发生化学反应； ④沸点适中，黏度较小； ⑤展开后组分斑点圆且集中； ⑥混合溶剂最好用新鲜配制。 Copyright © 2014 Dr. Qiang Liu 105 3. 实验药品与物性 样品： 1%偶氮苯和1%苏丹Ⅲ的甲苯溶液 固定相：硅胶板 展开剂：体积比9:1的甲苯一乙酸乙酯 azobenzene Sudan III 反式为橙红色棱形晶体，蒸气为深 棕红色粉末，用醋酸结晶为棕绿色金属光泽结晶 红色，溶于乙醇、乙醚，醋酸和水 ，溶于乙醚、丙酮、石油醚、油脂、氯仿、冰乙 酸、乙醇（呈红色溶液），不溶于水、碱溶液， 和硫酸呈蓝绿色溶