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西昌学院基础生物实验中心;一、实验目的 本实验是植物生理学课堂教学中的一个重要环节，不仅与课堂讲授的基本理论、基础知识相结合，而且要使学生学会植物生理学的基本实验方法，并在科学态度、实验技能技巧、独立工作能力、理论联系实际能力等方面获得基本的训练。;二、基本要求 通过教学，要使学生学会植物生理学的基本实验方法、技术和设计思路，掌握植物生理学基本原理的验证方法和定量测定植物体内发生的生理生化变化，并初步具有完成综合性、设计性实验的能力。每次实验结束，学生均需写出一份实验报告。 ;实验1 植物组织渗透势的测定; ;【方法与步骤】 配制各种浓度的蔗糖溶液→剥取洋葱鳞茎（或紫鸭趾草叶片）表皮→迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中→低倍显微镜观察并记录质壁分离的相对程度→确定使细胞发生初始质壁分离的浓度→计算渗透势 【思考题】 1.测定并计算不同植物组织的渗透势。 2.为什么选用有色素的洋葱鳞茎外表皮实验效果较好？ ;【实验原理】 根据物理化学溶液理论——拉乌尔冰点下降原理，溶液单位体积中所溶解的溶质颗粒总数相同，则引起冰点下降的数值相同。利用冰点渗透压计测定一定的冰点下降值对应的渗透浓度单位ic，代入公式计算。 【仪器与用品】 新鲜植物材料； 冰点渗透压计、液氮罐、注射器、纱布、吸水纸、Eppendorf管 ;【方法与步骤】 取材1-2克新鲜植物材料洗净包在锡箔纸中，放入液氮或低温冰箱中将细胞杀死→取出剪碎放入注射器溶冰，用加压法将胞液挤出，存于Eppendorf管待测→取20微升待测液于冰点渗透压计的测定管测定→提出探头，擦拭后可继续下一个样品的测定。 【思考题】 冰点下降法与质壁分离法的原理有何不同？ ;实验2 植物组织水势的测定 （小液流法）;【实验原理】 把等量的植物组织放入一系列具浓度梯度的蔗糖溶液中，利用小液流法寻找植物组织放入后浓度不变的蔗糖溶液，计算出此蔗糖溶液的渗透势即等于所测植物的水势。 【仪器与用品】 菠菜 试管 毛细滴管 移液器 剪刀 镊子 蔗糖 甲烯蓝;【方法与步骤】 配制一系列蔗糖溶液→各放入等量植物组织→加入次甲基蓝粉，染色→毛细管移取蓝色小液滴，放入未染色同浓度的蔗糖溶液中→找出液滴不动的蔗糖溶液→计算蔗糖溶液的渗透势＝所测植物组织的水势。 【思考题】 用小液流法测定植物组织水势与用质壁分离法测定植物细胞渗透势都是以外界溶液的浓度算出的溶质势为根据，它们之间的区别何在？;实验3 印迹法测定气孔开张度;【实验原理】 有些有机溶剂涂在叶片表面，失水很快形成一层薄膜，上面就印在叶片表面的保卫细胞与气孔的轮廓。在显微镜下可观察到，结合显微测微尺可测其开张度大小。 【仪器与用品】 植物叶片 显微镜 显微测微尺 载玻片 盖玻片 牛皮胶(或火棉胶);【方法与步骤】 配制牛皮胶溶液→在叶的下表皮涂胶→成膜后取一小片→镜检→测量 【思考题】 测量不同生境下、不同植物叶片的气孔开张度，比较后说明原因。 ;实验4 植物灰分元素的定性鉴定和定量分析;【实验原理】 植物风干样品在高温灼烧后，剩下灰分 灰分元素发生特定的化学反应后显现出颜色及结晶 灰分元素在高温下吸收特定光谱的能量发生能级的跃迁，可用原子吸收分光光度计定量测定;【仪器设备及试剂】 植物样品 高温电炉、显微镜、原子吸收分光光度计、坩埚等， 10%硝酸、5%盐酸、5%硫氰化钾等（见实验指导） 各元素的标准溶液;【实验步骤】 植物样品5g放在坩埚（已称重）中，在灰化炉中缓慢升温至400度，灰化1小时，冷却，称重。 取出一部分进行灰分元素的定性分析。详见实验指导45页 另取一部分称重，放于50ml烧杯中，10%硝酸5ml于电热板上加热熔解，定容于100ml容量瓶中。 原子吸收分光光度计测定其Ca、K、Mg、Fe、Zn、Mo含量（同时要测定和元素的标准曲线） 观察的现象描述及计算;【思考题】 灰分元素在植物样品中的含量是怎样的？ 各灰分元素的化学反应原理是什么？ 原子吸收分光光度计的工作原理以及他可以测定多种灰分元素的技术关键是什么？ ;实验5 植物的无土培养和缺素症状 ;[实验原理] 水溶液培养 缺乏某种元素会表现出特定的缺素症状 [仪器设备及试剂] 离子交换器 培养罐 玻璃房 漂浮盘、恒温培养箱、光照培养箱、刻度移液管、通气泵等 ;[实验操作] 水培液所需的化学试剂（化学纯） 培育玉米苗 配制营养储备液 配制完全培养液和缺素培养液 完全培养液及缺素培养液培养玉米苗 观察记载、根据实验结果描述缺素时所表现的典型症状，并分析其原因。;[思考题] 植物营养必须的大量元素和微量元素有哪些 植物的大量元素和微量元素缺乏时的表现症状有什么不同 如何做好植物的缺素实验;实验6 叶绿体色素的提取、分离及理化性质的鉴定; 【实验原理】 叶绿素是一