青霉素酰化酶法制备D-丙氨酸.pdfVIP

第25卷第11期 精 细 化 工 Vo1．25．No．I1 2008年 11月 FINE CHEMICALS NOV．200 8 青霉素酰化酶法制备 D．丙氨酸 李天童，刘鹏刚，刘 茜，焦庆才 (南京大学 生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室，江苏南京 210093) 摘要：报道了青霉素酰化酶法制备 D一丙氨酸的研究结果，为D一丙氨酸的制备提供了一种方法。考察 了pH、温 度、DL一丙氨酸与苯乙酰氯的摩尔比、反应时间对制备结果的影响。确定了制备 Ⅳ一苯乙酰一DL一丙氨酸的最佳反应 条件：pH=9．5，n(DL一丙氨酸)：n(苯乙酰氯)=1．1：1；酶促反应最佳条件为：pH=7．5，温度 37℃条件下反应 6 h，其产物为 Ⅳ一苯乙酰一D一丙氨酸和苯乙酸的混合物。该混合物用c(HCI)=6mol／L的盐酸高温回流6h得D一丙 氨酸盐酸盐，再经717阴离子树脂处理得D一丙氨酸。光学纯度为95．3％，总收率为72．5％。 关键词：固定化青霉素酰化酶；DL一丙氨酸；L一丙氨酸；D一丙氨酸；拆分；生物工程 中图分类号：FQ464．8 文献标识码：A 文章编号：1003—5214(2008)11—1066—04 PreparationofD—AlanineUsingImmobilizedPenicillinAcylase MTian·tong，LIUPeng—gang，LIUQian，JIAOQing—cai (TheStateKeyLaborator~ofPharm~weuticalBiotechnology，Schoolof，J Science，NanfingUniversity，Nanjing210093， Jiangsu，China) Abstract：N—Phenylacetyl—DL—alanine(I) wasformedby reacting DL—alanineand phenylacetyl cholorideinmolarratio1．1：1atpH =9．5．Then ．byenzymatichydrolyzationfor6hat37℃ andpH = 7．5，I producedamixtureofN—phenylacetyl—D—alanineandphenylaceticacid．Themixturewas hydrolyzedbyrefluxingwithHC1[C(HC1)=6mol／L]for6htoproduceD—alaninehydrochloride， whichcanbeturnedintoD—alaninebytreatingwith7l7anionresin．Theopticalpurityoftheproduct D—alanineis95．3％ ．andtheoverallyieldis72．5％ ． Key words：immobilized penicillin acylase；DL—alanine；L—alanine；D—alanine；resolution；biological engineering Foundationitem：SupportedbythetechnologyinnovationofundationofChina(02CJ一13—0l一16) D一丙氨酸作为细胞壁肽壁糖和肽抗生素广泛存 酮酸与R一一苯 乙胺反应 ，经 NaBH 还原可得 D一丙 在于有机组织中。近年的研究还发现，D一丙氨酸可 氨酸。然而类似的不对称合成法反应过程复杂，条 使体内氨基酸氧化酶 (DAAO)在肿瘤细胞质中异位