NT通路.ppt

病毒和基因治 目前国内外肿瘤基因治疗研究领域中，针对抑癌基因p53的重组人p53腺病毒是研究最为深入、进展最快的一种基因治疗产品，临床上也显示了较好的疗效．研究表明P53蛋白可上调泛素E3连接酶Siah-1的表达量和活性，促进和加强β-catenin的降解，阻止该信号途径转录因子Tcf-4的活化：或直接抑制Tcf-4的转录，从而抑制wnt/β-catenin信号途径． * 针对wnt/β-catenin信号途径的病毒和基因治疗研究的靶分子主要是该信号途径的关键分子β-catenin和核转录因子Tcf-4．以β-catenin为靶点的基因治疗策略主要是反义寡核苷酸和RNA干扰(RNAi)．研究报道， β-catenin反义寡核苷酸呈剂量依赖方式减少β-catenin mRNA和蛋白表达、Tcf4转录活性和cyclinDl表达，体内外显著抑制APc基因突变的大肠癌细胞增殖. * van de Wetering报道， β-catenin siRNA明显抑制大肠癌Lsl74T细胞Tcf4转录活性，并诱导细胞周期阻滞和促进细胞分化．vernla用非病毒载体0ligofectamine转染β-catenin siRNA，体内外对APC基因突变或β-catenin基因突变的大肠癌细胞均有明显的增殖抑制作用．Brunori利用大肠癌wnt/β-catenin信号途径异常激活的特点，构建了Tcf-限制复制型溶瘤腺病毒，病毒可在高β-catenin /Tcf-4转录活性的细胞中选择性复制而融解靶细胞，体外显示较好的抑制肿瘤生长作用． * 总之，Wn /β-catenin信号转导途径与大肠癌的发生、发展密切相关，针对该信号途径的分子靶向治疗策略有望为大肠癌的治疗提供新的有效途径，非甾体类抗炎药物和植物类化合物等多种非细胞毒性药物也将为大肠癌的预防和，综合治疗起到极其重要的作用． * 应用要点 分子靶向治疗是肿瘤治疗领域研究的重点方向之一．是一类极具发展前景的肿瘤治疗策略．Wnt/β-catenin信号转导途径与大肠癌等多种肿瘤的发生密切相关，因此可做为分子靶向治疗的潜在靶点． * * Wnt信号转导通路在肿瘤中的研究进展 1982年，在小鼠乳腺癌中发现了Wnt基因，由于该基因激活需依赖小鼠乳腺癌相关病毒基因的插入(insertion)，因此，最初被命名为Intl癌基因。随后的研究表明，Intl基因在小鼠正常胚胎的发育中起重要作用，相当于果蝇的无翅(Wingless)基因，其编码的蛋白在细胞间传递生长和发育信息，可控制胚胎轴向的正常发育。此后，大量研究均提示了Intl基因在神经系统胚胎发育中的重要性。因此，将Wingless与Intl结合，称为Wnt基因。人Wnt基因定位于染色体12q13。在胚胎发育中，Writ基因调控的重要信号转导系统即为Wnt通路。 * Wnt信号转导通路有4个主要分支： ① 经典wnt通路。该通路通过p连环蛋白(β-catenin)在核中累积而启动靶基因? 。 (2)Planer细胞极性通路。涉及RhoA和Jun激酶，调控细胞骨架的重排，其主要作用是对胚胎发育进行阶段性调控。 ③Wnt／Ca 通路。此通路由Wnt 5和Wnt 11激活，引起细胞内Ca 和Ca 敏感信号成分的激活，如钙调蛋白依赖的激酶和激活T细胞核因子。该通路能拮抗经典的Wnt通路。 ④调节纺锤体的方向和非对称细胞分裂的细胞内途径。wnt信号通路的一些分子，如糖原合成酶激酶3β (glycogen synthase kinaseo313，GSK·3β)和结直肠腺瘤息肉蛋白(adenomatous polyposis coli，APC)，参与某些生物如果蝇和线虫细胞分裂过程中纺锤体方向的确定和非对称细胞分裂。 * Wn /β-catenin信号转导通路为靶点的抗肿瘤治疗 越来越多的研究表明， Wn /β-catenin信号转导通路与人类肿瘤密切相关。针对Wn /β-catenin信号转导通路中信号分子为靶点的抑制剂已成为抗肿瘤的候选药物。 * 在细胞外水平阻断Wnt信号 Wnt 配体本身可通过反义寡核苷酸技术、RNA干扰技术及中和抗体技术等成为抗肿瘤治疗靶点。Wnt信号分子的拮抗剂，如与Wnt信号分子特异性结合的卷曲相关蛋白(frizzled-related proteins，FRPs)和DKKs，已成为天然的抗肿瘤药物。DKK蛋白是 wnt辅助受体LRP5／6的拮抗剂，具有抗肿瘤潜能，在人类中已发现4种DKK蛋白。Hoang等研究发现，DKK-3及LRP5显性负突变体在肉瘤细胞Saos-2中的表达可明显降低其侵袭和细胞运动能力，并可诱导β-cate