从基因工程乳酸菌中高效提取苯丙氨酸解氨酶的方法研究.pdfVIP

生物技术通报 年第 期 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2008 3 从基因工程乳酸菌中高效提取苯丙氨酸解氨酶的方法研究 1 2 2 1 陈星 王璞 姚滢秋 肖白 1 2 ( 首都医科大学附属北京朝阳医院基础医学研究中心,北京 ;首都师范大学生命科学学院,北京 ) 100020 100037 摘 要: 为从高表达苯丙氨酸解氨酶( )的基因工程乳酸乳球菌 art中有效提取所表达的 PAL NZ3900/pNZ8149-pal PAL酶,针对乳酸乳球菌的特点,结合各种物理、化学、生物学等方法,探索出一条简便、高效的技术路线。对提取物进行了 酶活性测定、分析及细菌活性鉴定。结果表明,该混合法可以完全导致细菌死亡,所提取的酶蛋白结构完整,其酶活性达 到了等量活菌的92.5%,且该方法中所用到的各种试剂对体外培养细胞的生长无明显影响,为PAL酶在科研及生物医药 领域的应用提供了可靠来源。 关键词: 乳酸乳球菌 苯丙氨酸解氨酶 提取 StrategyofExtractingPhenylalanineAmmonia-lyasefrom GeneticEngineeringLactococcusLactis 1 2 2 1 ChenXing WangPu YaoYingqiu XiaoBai (1 , , ; BasicMedicalResearchCenterBeijingChaoyangHospitalAffiliateofCapitalofMedicalUniversityBeijing100020 2 , , ) CollegeofLifeScienceCapitalNormalUniversityBeijing100037 : ( ) ( Abstract Toextractphenylalanineammonia-lyasePAL fromgeneticengineeringLactococcusLactisNZ3900/pNZ81 art ), , 49-pal weappliedmanymethodsofphysicschemistryandbiologytofindasuitablestrategy.Thentheactivitiesand , thepurities