解说兽用疫苗生产.pptVIP

2、改进新技术 1）分子设计与基因工程技术 亚单位疫苗、基因缺失疫苗、活载体疫苗、DNA疫苗转基因植物疫苗等。 2）抗原缓释技术 将抗原制成聚合物，增加抗原效能、延长疫苗免疫期。 3）新型免疫佐剂 减少副反应，提高细胞免疫调节作用。 4）新型生物发酵技术 传统的生物发酵罐变为生物反应器，实现了程序化操作。 5）现代细胞工程技术 利用细胞反应器进行细胞微载体培养和悬浮培养。 * 三、 兽用诊断试剂的制备 兽用诊断制品中使用的微生物都具有抗原性，根据抗原与抗体特异性结合或核酸碱基配对的原理，利用微生物及其代谢产物或动物血液及组织材料制成的可用于畜禽疾病诊断的制品称为诊断用生物制品，包括诊断抗原、诊断血清、标记抗体及核酸探针等。 * （一）诊断抗原的制备 1、诊断抗原类型 按性质可将诊断抗原分颗粒性抗原和可溶性抗原。按照诊断试验的种类可将诊断抗原分为凝集反应抗原、补体结合反应抗原、酶联免疫吸附试验抗原、中和试验抗原、琼扩试验抗原、变态反应抗原及对流免疫电泳抗原等。 * 1、诊断抗原类型 1）凝集反应抗原 此类抗原多为颗粒性抗原，在有电解质的情况下，与特异性抗体结合形成肉眼可见的凝集块，称凝集反应。参与凝集反应的抗原为凝集原，抗体为凝集素。凝集反应有直接凝集反应和间接凝集反应。直接凝集试验只适用于不产生自凝现象的细菌，所以应用面较窄。间接凝集反应是将病原微生物的可溶性抗原物质吸附在颗粒性载体如红细胞、胶乳颗粒、炭素颗粒等的表面，制备成可产生凝集反应的颗粒性抗原成分。用红细胞作抗原载体的凝集反应称间接血凝试验。相反将免疫球蛋白连接到红细胞的表面，即为反相间接血凝试验。 * 2）补体结合反应抗原 在补体结合试验中有两个反应系统：即检验系统和指示系统（溶血系统）。检验系统包括已知的抗原（或抗体）、被检的抗体（或抗原）和补体。指示系统包括绵羊红细胞、溶血素和补体。补体是两个系统共用的。如果检验系统中抗原与抗体形成复合物，则补体被结合不再游离，随后加入的指示系统不发生溶血现象。反之若抗原与抗体不相应，则不能结合补体，补体即参与溶血系统反应，导致溶血现象。根据指示系统的溶血情况可以间接测定特异性抗原与抗体是否存在及其含量，从而对抗原或抗体进行定性或定量。 * 3）酶联免疫吸附试验抗原 将抗原或抗体吸附于固相载体，在载体上进行免疫酶染色，底物显色后用肉眼或分光光度计判定结果，包括直接法、间接法、双抗体夹心法、竞争法等。 4）中和试验抗原 中和试验是一种常用的诊断试验方法，既可用于定性试验，又可用于定量试验。既有固定血清—稀释病毒方法（?法），又有固定病毒—稀释血清（?法）。 5）免疫沉淀试验抗原 当可溶性抗原与其相应的抗体在溶液中或琼脂凝胶中扩散接触时，形成的抗原－抗体复合物成为肉眼可见的不溶性沉淀物，即为免疫沉淀反应。 * 6）变态反应抗原 某些细胞内寄生菌、病毒、真菌、寄生虫等，感染后可引起以细胞免疫为主的IV型变态反应。由于这种反应具有高度的特异性和敏感性，因此临床上常利用变态反应作为某些传染病的诊断方法。如鼻疽菌素、结核菌素、布氏菌水解素、提纯副结核菌素等。 * 2、诊断抗原的制备 基本技术路线包括：选择抗原性良好的菌（毒）株 ??? 生产用菌（毒）种的制备与鉴定??? 制备细菌抗原用培养基或制备病毒抗原用细胞或动物等原材料的选择??? 细菌（固体或液体）的培养或病毒液的繁殖、收获???抗原液的灭活 ??? 抗原的提纯、浓缩??? 除菌过滤 ??? 抗原的检验??? 抗原的分装与冻干???保存。 不同的微生物制备诊断抗原的方法不同，不同的抗原制备方法也有差异。有些抗原需要较复杂的工艺，如变态反应抗原、免疫沉淀试验抗原的制备往往需要提纯和浓缩抗原，以增加抗原反应的特异性和敏感性。中和试验抗原制备比较简单，一般不需提纯与浓缩。 * （二）诊断血清的制备 诊断血清是一类含有特异性抗体、用于诊断或鉴定微生物的生物制剂，包括各种诊断血清、分群血清或分型血清等。 1、免疫动物的选择 制备免疫血清的动物多为家兔、豚鼠、马、牛、羊及鸡等。免疫前，须经确认无传染病并健康者方可使用。禽类血清有抗补体成分，在制备补体结合试验用抗血清时应选用哺乳动物。 2、免疫抗原的制备 制备免疫血清的抗原，多为微生物体或其毒素(类毒素)，或其提取物等纯化完全抗原。免疫抗原的提纯和浓缩，是制出高效价血清的先决条件。 * 3、免疫方法和免疫程序 免疫原注射多采用皮下或肌肉途径注射，大量抗原注射则以静脉途径较好，但抗毒素免疫则不采用静脉途径，应以背部多点注射为宜。 有一些用球蛋白抗原制备抗抗体血清时，须要加适当佐剂注射，如用弗氏完全或不完全佐剂，背部皮下多点注射，第一次免疫加完全佐剂，以后多次免疫只能使用不完全佐剂，隔7—10天加强免疫一次，可以获得