生物工程——03培养基.pptVIP

* * * * * * * * 第三章 培养基及其制备 Culture Medium and its Preparation * 发酵的一般流程 种子扩大培养 培养基配制 空气除菌 培养基灭菌 发酵生产 下游处理 发酵设备 * 提纲 培养基的原材料 培养基的营养成分、功能及配置原则 培养基的类型与用途 淀粉水解糖的制备：酸解法、酶解法、酶酸结合法 前体物质及促进剂 前体物质 促进剂和抑制剂 * 一、培养基的原材料 培养基(Culture medium)：选用各种营养物质，经配制成适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质 * 一、培养基的原材料 培养基的营养成分及其功能 碳源(Carbon source)【糖类、脂肪、有机酸】：能源物质，构成菌体和代谢产物 氮源(Nitrogen source)【无机氮源：氨水、硫酸铵、尿素、硝酸钠；有机氮源：发酵菌丝体、酒糟】：构成菌体和代谢产物，硝化细菌的能源物质 无机盐类(Mineral nutrition)【Pb 、 Mg 、 S 、 P 、 Fe、Co、Zn等】：维持酶活力，调节渗透压、pH值、电位等 特殊生长因子【生物素、硫胺素、肌醇等】：构成辅酶的组成部分，促进生命活动 水：溶解营养物质和代谢产物 * 一、培养基的原材料 培养基的配置原则 根据不同微生物的需要配置不同的培养基 各种营养物质的浓度与配比，特别是C/N 将培养基的pH控制在一定范围内 考虑利用价廉且易于获得的原料 * 一、培养基的原材料 培养基的类型 分类依据 类型营养物质来源 天然、合成、半合成培养基形式 液体、固体、半液体培养基的成分和目的 基本、完全、鉴别、选择生产工艺的要求 孢子(Spore)、种子、发酵 培养基的用途：筛选菌种、保藏菌种、检验杂菌、培养种子、发酵生产等 * 二、淀粉水解糖的制备 糖化(Saccharify)：在工业生产上将淀粉水解为葡萄糖的过程，得到的水解糖液叫淀粉糖。 糖化的原料：薯类淀粉、玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉等。 水解糖液的质量直接关系到生产菌的生长速度与代谢产物的积累，其中的低聚糖类与复合糖类等杂质越低越好。 * 二、淀粉水解糖的制备 酸解法 反应原理：淀粉——————葡萄糖 优点：设备单一、时间短（几分钟） 缺点： 对设备要求高（高温、高压、高腐蚀） 副反应多，淀粉转化率低 对原料要求高，淀粉颗粒大小均匀 淀粉乳浓度不能太高 酸（催化剂） 高温高压 Starch Glucose * 二、淀粉水解糖的制备 酶解法（双酶水解法） 反应原理：淀粉———糊精、低聚糖 ———葡萄糖 优点： 对设备要求低， 副反应少，产品纯度高，营养丰富 对原料要求较低，淀粉乳浓度高缺点： 所需设备较多 反应时间较长（2-3天） ?淀粉酶 糖化酶 液化 糖化 * 二、淀粉水解糖的制备 酶酸结合法之一，酸酶法 反应原理：淀粉———糊精、低聚糖 ———葡萄糖 优点： 产品质量高，反应时间较短（2d） 对原料要求较低，淀粉乳浓度较高 用酸量少 酸水解 糖化酶 * 二、淀粉水解糖的制备 酶酸结合法之二，酶酸法 反应原理：淀粉———糊精、低聚糖 ———葡萄糖 优点： 反应时间短（2hrs），产品质量较好 对原料要求较低，淀粉乳浓度较高 对淀粉颗粒大小无严格要求 ?淀粉酶 酸水解 30min 30min * 二、淀粉水解糖的制备 几种水解方法的比较 从时间上看：酸解法最快，酶解法最慢 从原料转化率和糖液质量上看：酶解法酸酶法酶酸法酸解法 * 三、前体物质及促进剂 前体物质(Precursor)：某些化合物加入培养基后，能够直接在生物合成过程中结合到产物分子中去，而自身的结构并未发生太大变化，却能提高产物的产量。这类小分子物质被称为前体。 抗生素(Antibiotin)发酵中常用的前体物质： 抗生素 前 体 物 质 青霉素Ｇ 苯乙酸（或在发酵中生成苯乙酸的物质） 链霉素 肌醇、精氨酸、甲硫氨酸 红霉素 丙酸、丙醇、丙酸盐、乙酸盐 * 三、前体物质及促进剂 影响前体物质效力的因素 菌种的特性与菌龄(Cell age) 前体物质的投入量(Inoculation concentration) 前体物质的毒性(Toxicity) 苯乙酸用量（％） 青霉素产量（单位/ml) 青霉素Ｇ比例（％） 0.1 ７７５０ 57.3 0.2 ８５１５ 73.0 0.3 ９６３０ 90.6 0.