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酒精对兔骨髓间充质干细胞成骨分化的影响探究
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中文摘要
目 的:对兔股骨头髓内间充质干细胞进行分离,分析观察充质干细胞
(BMSCs)在体外培养状态下的生长情况,对两种成骨细胞诱导分化方法
及分化能力进行对比,并研究观察酒精对体外培养成骨细胞凋亡的影响。
方 法:运用密度梯度离心法获取兔骨髓间充质干细胞,采用倒置显
微镜进行形态学观察;实验组:为用含有诱导剂的低糖DMEM:嘻养基的诱
导培养组;对照组:为常规培养组,倒置显微钰皿染色观察记录各代次细
胞形态等特征;通过碱性磷酸酶(ALP)染色及标准化钙结节计数,鉴定细倒
置显微镜及髓染色观察记录细胞形态等特征。体外分离培养成骨细胞后,
随机分组进行不同浓度酒精干预,利用AO/EB染色观察细胞凋亡形态学
改变。
结 果:培养12后对两组细胞进行ALP染色,显示实验组细胞质内
ALP染色阳性反应明显,对照组染色显色弱,实验组细胞钙化结节数量
多且较大,对照组也有钙结节形成,但较小。实验组标准化钙结节计数显
著高于对照组,差异具有显著统计学意义(尸DD5),加入o.15mol/L酒精
干预后,成骨细胞发生皱缩,AO/EB染色出现凋亡细胞。
结 论:通过密度梯度离心贴壁法所获得的BMSCs在常规培养或诱导
培养时均可表现出成骨潜能,诱导培养成骨能力确切,可为骨组织实验研
究提供理想的细胞模型,酒精可以引起体外培养成骨细胞凋亡,是酒精性
骨损害的发生机制之一。
关键词:骨髓间充质干细胞;成骨细胞;细胞培
Alcoholontheinfluenceofthe differentiationof
osteogenetic
stemcellsoftherabbitbonemarrow
mesenchymal study
ABSTRACT
defecttreatmentof
bones,bone experimental
Objective:Broken
researchonthebasisof allidealcell ofrabbit
establishing model,observation
of
bonemarrow stem vitroculturecondition
mesenchymalcells(BMSCs)in
thedifferentiationofosteoblastand
growth,for stuayability.Research.
extractionofrabbitbone
gradientcentrifugation
Methods:density
marrow stem observedinverted
cells,were by microscope;the
mesenchymal
inductionmedium low
experimentalgroup:Culturedgroup
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