dna体外重组的实现 5.pptVIP

　 　 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ * * 专题1 基因工程 学习目标： 1、了解基因工程的概念 2、了解基因工程的诞生 3、理解基因工程中三种基本工具的作用 一、基因工程的概念 1、原理： 2、操作水平： 3、又称： 4、优点： 基因重组 DNA分子水平 DNA重组技术或基因拼接技术 ⑴ 定向改造生物性状 ⑵ 克服远缘杂交不亲和的障碍 ⑶ 育种周期短 二、基因工程的诞生 （一）基础理论： 1、DNA是遗传物质的证明 2、DNA双螺旋结构和中心法则的确立 3、遗传密码的破译 （二）技术发明： 1、基因转移载体的发现 2、工具酶的发明 3、DNA合成和测序技术的发明 4、DNA体外重组的实现 5、重组DNA表达实验的成功 6、第一例转基因生物的问世 7、PCR技术的发明 （二）技术发明： 三、基因工程的基本工具 请同学们看书，思考以下问题： 1、基因工程中三种基本工具的作用分 别是什么？ 2、工具酶的作用部位分别在哪？ 3、具备什么条件才能充当“分子运输 车”？ （一）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶 1、来源： 主要来自原核生物 2、特点： 具有专一性（特异性） 表现在两方面： (1)识别双链DNA中特定核苷酸序列 (2)切割特定序列中的特定位点 3、作用： 特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键断开 4、结果： 产生黏性末端或平末端 SmaⅠ 平末端　　　平末端 EcoRⅠ 黏性末端　　　　 黏性末端 （二）“分子缝合针”——DNA连接酶 1、种类： ⑴ E·coli DNA连接酶 ⑵ T4 DNA连接酶 2、作用： 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， E·coli DNA连接酶　　　　　　　　或T4DNA连接酶 即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 *