剑尾鱼卵黄脂磷蛋白的纯化及免疫分析 - 华南师范大学生命科学学院.pdfVIP

第 3 1卷第 5 期 水 　产 　学 　报 V o l. 3 1, N o. 5　 　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2007 年 9 月 　 JOU RNAL O F F ISH ER IES O F CH INA S ep. , 2007　 文章编号 : 1000 - 06 15 ( 2007 ) 05 - 0647 - 08 剑尾鱼卵黄脂磷蛋白的纯化及免疫分析 1, 2 1 3 1 1 1 温茹淑 , 　方展强 , 　江世贵 , 　马广智 , 　徐 　杰 , 　姚 　静 ( 1. 华南师范大学生命科学学院, 广东 广州 　5 1063 1; 2. 嘉应学院生物系 , 广东 梅州 　5 140 15; 3. 农业部渔业生态环境重点开放实验室 , 广东省渔业生态环境重点实验室 , 中国水产科学研究院南海水产研究所 , 广东 广州 　5 10300) 摘要 :采用 S ep hacry l S 300 凝胶过滤层析柱和 H iT rap Q 阴离子交换柱从卵黄生成期的雌性剑 ( ) ( ) 尾鱼 X ip hop horus helleri 卵巢组织提纯了卵黄脂磷蛋白 L v 。已确定被纯化的剑尾鱼 L v 在 N ativePA G E ( 4 % ～7. 5 % ) 电泳中分子量为 530 kD 左右 。N ativePA G E ( 4 % ～7. 5 % ) 电泳后 的凝胶分别进行糖蛋白染色 、脂蛋白染色及磷蛋白染色 。结果表明, 剑尾鱼 L v 是一种富含 糖 、脂 、磷的蛋白。用纯化的剑尾鱼 L v 免疫大白鼠获得鼠源多克隆抗血清 。用免疫双扩散的 方法测定 L v 抗血清的效价为 l ∶32 。W estern b lo tting 检测显示抗血清的特异性较好; 卵黄蛋 ( ) 白原 V tg 和 L v 抗血清之间存在明显的免疫交叉反应 , 表明 V tg 和 L v 两者具有相同的免疫 原性 。免疫双扩散检测表明,抗 L v 血清表现出明显的雌性特异性和种的特异性 。 关键词 :剑尾鱼; 卵黄脂磷蛋白; 纯化; 免疫分析 中图分类号 : Q 579. 1; S 9 17　　　　　　　文献标识码 : A Pur if ica tion and imm une ana ly sis of lipov itellin from X iph oph oru s h e ller i 1, 2 1 3