阿米洛利通过自噬溶酶体途径保护pc12细胞 - 江苏大学.pdfVIP

第２４卷第４期 江 苏 大 学 学 报（医学 版） Ｖｏｌ．２４ Ｎｏ．４ 　 ２０１４年７月 　 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃｉｎｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｊｕｌ．２０１４ 　 　 　 　 　 　 阿米洛利通过自噬 溶酶体途径保护ＰＣ１２细胞 张润娉，李建平 （苏州高新区人民医院神经内科，江苏 苏州２１５１２９） ［摘要］　目的：研究酸敏感离子通道阻断剂阿米洛利对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤ＰＣ１２细胞株的保护作用及其对自噬 ＋ 溶酶体通路的影响。方法：在ＰＣ１２细胞模型上，观察甲基苯基吡啶（ｍｅｔｈｙｐｈｅｎｙｌｐｙｒｉｄｉ，ＭＰＰ ）处理对细胞存活率 ＋ （ＭＴＴ检测）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出率、细胞凋亡率的影响，并观察阿米洛利对 ＭＰＰ所致细胞死亡的影响；蛋白质 印迹法检测大自噬通路标志蛋白ＬＣ３和分子伴侣介导的自噬通路标志蛋白ＬＡＭＰ２ａ表达水平的变化。结果：ＭＰＰ＋ 导致细胞存活率明显降低，上清液中ＬＤＨ漏出率明显升高，细胞凋亡率升高，抑制大自噬通路标志蛋白ＬＣ３ 的表 Ⅱ 达，同时上调了分子伴侣介导的自噬通路标志性蛋白ＬＡＭＰ２ａ的表达水平；而阿米洛利可提高细胞存活率，减少上清 液中ＬＤＨ漏出率，降低细胞凋亡率，并能在激活大自噬通路的同时下调分子伴侣介导的自噬通路的活性。结论：阿 ＋ 米洛利可能通过抑制酸敏感离子通道的作用拮抗ＭＰＰ诱导的ＰＣ１２细胞自噬性死亡。 ＋ ［关键词］　阿米洛利；ＰＣ１２细胞；ＭＰＰ ；自噬 溶酶体通路 ［中图分类号］　Ｒ９７１　　［文献标志码］　Ａ　　［文章编号］　１６７１－７７８３（２０１４）０４－０３５９－０４ ＤＯＩ：１０．１３３１２／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１７７８３．ｙ１４００１２６ ＋ ＡｍｉｌｏｒｉｄｅｐｒｏｔｅｃｔｓＰＣ１２ｃｅｌｌｓｆｒｏｍＭＰＰ ｉｎｄｕｃｅｄｉｎｊｕｒｙ ｖｉａａｕｔｏｐｈａｇｙｌｙｓｏｓｏｍｅｐａｔｈｗａｙ ＺＨＡＮＧＲｕｎｐｉｎｇ，ＬＩＪｉａｎｐｉｎｇ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ＳｕｚｈｏｕＮｅｗＤｉｓｔｒｉｃｔＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｕｚｈｏｕＪｉａｎｇｓｕ２１５１２９，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｍｉｌｏｒｉｄｅ；ａｎｏｎｓｅｌｅｃｔｉｖｅｂｌｏｃｋｅｒｓｏｆ ａｃｉｄｓｅｎｓｉｎｇｉｏｎｃｈａｎｎｅｌｓ，ｏｎＰＣ１２ｃｅｌｌｓａｎｄｔｏｖｉｅｗｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆａｕｔｏｐｈａｇｙｌｙｓｏｓｏｍｅｐａｔｈｗａｙ（ＡＬＰ）． ＋ Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＰＣ１２ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄｗｉｔｈｍｅｔｈｙｐｈｅｎｙｌｐｙｒｉｄｉ（ＭＰＰ ），ｗｈｉｌｅｇｉｖｉｎｇａｍｉｌｏｒｉｄｅａｓ