稳定表达hiv-1 辅助蛋白rev 的thp-1 细胞模型的建立和鉴定.pdfVIP

动 物 学 研 究 2008，Aug. 29(4) ：421-426 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research doi:10.3724/SP.J.1141.2008.04421 稳定表达 HIV-1 辅助蛋白 Rev 的 THP-1 细胞模型的建立和鉴定 1, 2 1, 2 1, 2 1 1, * 周慧芳 ，陆小鹏 ，孙正华 ，郭 彦 ，张华堂 （1. 中科院昆明动物研究所 免疫生物学实验室，云南 昆明 650223 ；2. 中国科学院研究生院， 北京 100049 ） 摘要：Human immunodeficiency virus-1 （HIV-1 ）辅助蛋白在其感染和艾滋病发病过程中起着非常重要的作用。 Regulator of expression of virion proteins （Rev ）作为HIV-1 辅助蛋白之一，可以调节病毒结构蛋白mRNA 出核转 运和蛋白表达，对于病毒的复制至关重要。为研究Rev 蛋白对靶细胞表型和功能的影响，本实验采用电穿孔的方 法，将HIV-1 的rev 基因导入THP-1 细胞，通过流式分选结合G418 筛选的方法建立稳定表达Rev 蛋白的细胞模 型；并通过RT-PCR 、荧光观察及流式检测的方法，在mRNA 和蛋白两个水平对所建立的细胞模型进行鉴定。结 果证实rev 基因成功导入了THP-1 细胞并稳定表达，为后续rev 基因产物与细胞相互作用的研究提供了平台。 关键词：Rev ；THP-1 ；稳定表达 中图分类号：Q344.13; Q786 文献标识码：A 文章编号：0254-5853-(2008)04-0421-06 Establishment and Characterization of THP-1 Cell Model Stably Expressing HIV-1 Auxiliary Protein Rev 1, 2 1, 2 1, 2 1 1,* ZHOU Hui-fang , LU Xiao-peng , SUN Zheng-hua , GUO Yan , ZHANG Hua-tang (1. Immunobiology Lab, Kunming Institute of Zoology, the Chinese Academy of Sciences, Kunming Yunnan 650223, China; 2. Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China) Abstract: HIV-1 auxiliary proteins play a critical role in both the infection of HIV-1 target cells and the morbidity of AIDS. Rev, as one of the HIV-1 auxiliary proteins, is essential for the replication of HIV-1. As a membrane-shutt