8 shi jy, yang lx, wang zc,et al cc chemokine - 安徽医药杂志社.docVIP

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2017-09-02 发布于天津
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8 shi jy, yang lx, wang zc,et al cc chemokine - 安徽医药杂志社

本稿已查重，查重率15.6% CCL21对胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化的影响( 史冠男1，袁媛2，彭琼1，戴夫230061）摘要目的方法、Western blot分别检测E-cadherin、N-cadherin、VimentinMMP-9的蛋白表达。结果E-cadherin蛋白表达下降（p0.05）,N-cadherin、Vimentin、MMP-9蛋白表达升高（p0.05）。结论关键词；； gastric cancer cells Shi Guannan1，Yuan Yuan2，Peng Qiong1，Dai Fu1 （Dept?of?Gastroenterology, The First People’s Hospital of Hefei 2Dept?of Oncology, Bin Hu Hospital of Hefei 230061）Abstract Objective To investigate CCL21 whether can induce epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer cells SGC-7901. Methods SGC-7901 cells were induced by CCL21 in different concentration (0, 50, 100, 150 ng/ml) then detect the ability of invasion and metastasis by scratch testing. Observing morphological change. The protein expression of E-cadherin, N-cadherin, Vimentin ，MMP-9 was detected by Western blot. Results After were induced by CCL21 in 150ng/ml, SGC-7901 cells have faster ability of invasion and metastasis.SGC-7901 cells form into a long spindle and born locomotion. The expression of N-cadherin,Vimentin,MMP-9 were higher （0.05）and E-cadherin was obviously desdend（0.05）.Conclusion CCL21 may induces epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer cell and promote the invasion and metastasis. Key words: Epithelial-mesenchymal transition, Chemokine, Gastric Cancer 0 引言转化生长因子-β1（ransforming growth factor-β1,TGF-β1)已被公认并广泛使用于诱导EMT 的发生[1]。近年来，关于趋化因子家族是否参与、介导或启动恶性肿瘤的转移已成为国内外探讨热点。其中，C-C趋化因子受体7(C-C chemokine receptortype 7,CCR7) 及其配体21［Chemokine( C-C motif) ligand 21，CCL21］已被报导可能参与调控如卵巢癌[2] 、乳腺癌[3]、胰腺癌[4]等多种肿瘤发生EMT，但趋化因子是否通过EMT在胃癌转移中发生作用，报导甚少，本文旨在初探该方面机制。 1 材料与方法 1.1 细胞系胃癌细胞SGC-7901由合肥市第一人民医院集团-滨湖医院中心实验室提供。 1.2 主要试剂本研究采用主要试剂：胎牛血清-(天杭, 浙江，中国)，RPMI 1640培养基-(Hyclone，美国)， E-钙粘蛋白E-cadherin)、N-钙粘蛋白N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶 9 (MMP-9)-（Sigema，美国）；CCL21、β-actin一抗、二抗（中杉金桥北京细胞培养2ng/ml TGF-β1）。 1.3.2 细胞划痕试验将细胞铺于6孔板约5×105个细胞、10ul枪头划痕h，取样拍照Western blot检测E-cadherin、N-cadherin，μg上样，进行SDSPAGE电泳转膜5％脱脂奶粉的TBST液封闭 h；一抗1：500，4℃孵育过夜二抗1：0，室温孵育1 h显影定影统计处理SPSS13.0分析统计,计量资料结