大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白c 受体（sepcr）酶联免疫分析（ elisa .pdf

ELISA 大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）酶联免疫分析（ ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相 关液体样本中可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C 受体（sEPCR） 水平。用纯化的大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C 受体（sEPCR）抗体包被微孔板，制成固 相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性血管内皮细胞蛋白C 受体（sEPCR），再与HRP 标记的可溶性血管内皮细胞蛋白C 受体（sEPCR）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合 物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作 用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的可溶性血管内皮细胞蛋白C 受体（sEPCR） 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠 可溶性血管内皮细胞蛋白C 受体（sEPCR）浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1 份 1 份 封板膜 2 片（48） 2 片（96） 密封袋 1 个 1 个 酶标包被板 1×48 1 ×96 2-8℃保存 标准品：360µg/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存 显色剂A 液 3ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存 显色剂B 液 3ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml ×20 倍）×1 瓶 （20ml ×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1.血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后， 离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再 次离心。 3.尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中 如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS （PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓 1 度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使