CD4OL基因及尿嘧啶核苷磷酸化酶基因的抗肿瘤机制的研究.pdf

中文摘要 CD40L基因和尿嘧啶核苷磷酸化酶基因的抗肿瘤机制的研究 第一篇 转染CD40L基因的卵巢癌细胞抗肿瘤效应 及其诱导树突状细胞分泌细胞因子机制的研究 摘． 要 卵巢癌是妇科最常见的一种恶性肿瘤，具有恶性程度高，早期不易 发现，易复发转移等特点。虽然卵巢癌的治疗手段如手术切除、’放射治疗 和化学治疗等常规治疗方法均有一定程度的进展，但其高复发率和容易转 移等问题仍不能解决，致使5年生存率始终维持在30％左右，严重威胁着 广大妇女的生命健康。虽然经根治性手术治疗或手术后辅助放化疗在一定 程度上减少了卵巢癌的复发，但残余病灶的存在往往增加了化疗的负担和 复发的几率，尤其是广泛腹腔播散的晚期卵巢癌患者，预后极差。因此， 作为对传统疗方法的补充，用以改善晚期和复发患者预后的新疗法的研究 势在必行。许多研究提示，对于残余癌灶较少的患者，在手术后经辅助化 疗，再用基因修饰的肿瘤细胞作为肿瘤疫苗进行免疫生物治疗，或采用肿 瘤的抑癌基因等治疗策略对于改善患者预后，降低复发率具有潜在的良好 的应用前景。因此，探索肿瘤细胞增殖和转移抑制剂、分化诱导剂、放化 疗增敏剂，基因治疗、干细胞治疗、免疫生物治疗等卵巢癌的新疗法非常 迫切。 目前，手术、化疗和放疗仍是卵巢癌的主要治疗手段，但是都存在 一定的局限性。肿瘤的免疫基因治疗不仅能提高宿主的免疫能力和特异性 杀伤肿瘤细胞的能力，而且对正常组织细胞有较少的毒副作用，因此，越 来越受到人们的重视。近年来，随着基因转移技术的进展和人们对淋巴细 、■P 胞激活途径的进一步认识，采用细胞因子基因或其它外源性基因治疗肿瘤 成为备受关注的肿瘤治疗策略之二。外源性免疫相关基因在肿瘤细胞的表 达可通过提高宿主的免疫反应产生抗肿瘤效应，尤其是细胞因子基因可促 使静止期T细胞分化成辅助性T细胞(Th)，从而有效激活T细胞介导的 细胞免疫反应。研究表明，可采用病毒和非病毒载体将基因转染到卵巢癌 等不同的细胞中，用于基因治疗研究。病毒载体包括腺病毒、腺相关病毒、 重组腺病毒、反转录病毒、单纯性疱疹病毒、细小病毒载体等；非病毒载 中文摘要 避免产生免疫耐受。体内大部分的DC处于非成熟状态，表达低水平的共 刺激分子和粘附分子，在体内外激发同种混合淋巴细胞反应的能力较低， 但具有极强的抗原吞噬能力。不成熟的DC在摄取肿瘤抗原后，必须被活 化信号激活变成成熟DC才能将抗原提呈抗原给T细胞，而这一活化过程 活DC并使之成熟，成熟DC分泌一系列细胞因子，如白介素(IL)一12、 胞免疫反应的初始过程。 有研究证实，非淋巴组织中CD40L基因的表达也可激活机体的系统 体产生抗肿瘤免疫反应：CD40L基因治疗已应用于临床治疗慢性淋巴细 胞白血病。对CD40L介导的抗肿瘤免疫反应机制研究结果显示，CD40L 可通过与CD40的特异性结合反应激活DC，进一步增强CTL的活性，增 强肿瘤细胞的免疫原性，克服肿瘤细胞对CD4●和CD8+的免疫耐受，从而 增强抗肿瘤免疫。但是，CD40L基因的抗肿瘤效果和作用机制，如诱导 DC对抗原提呈功能的影响，对T细胞免疫功能和细胞因子如IL．12、IL．23、 IL．27分泌等的影响仍不十分清楚。综上所述，探讨CD40L基因及其瘤苗 在卵巢癌治疗中的效果及作用机制，研究其临床可行性非常必要。 第一部分小鼠卵巢癌荷瘤动物模型的构建和卵巢癌细胞系生物特性研 究 目的：卵巢癌是妇科肿瘤中恶性程度最高的肿瘤，但仍缺少早期发现、 有效治疗、防止复发和克服耐药性等良好方法。开发研究这些方法不能在 人体进行，因此，建立稳定的卵巢癌动物模型不仅可以研究卵巢癌发生的 生物遗传因素，还可以为干预治疗策略的研究提供理论有效工具。小鼠卵 巢癌动