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* 离心式分析仪：将样本和试剂放在特制的圆盘上，圆盘装在离心机上作为转头。受离心力作用而相互混合。反应速度快。缺点同一时间只能做同一项目测定。 干式生化：价格昂贵，适合急诊。 * 试剂反应原理 * 比色法（仪器上一般设置为终点法） 酶法；连续监测法（速率法） 免疫比浊法 * 化学试剂盒常用的反应原理 比色法 由单纯的化学物质参与反应，呈色，在一定波长下比色。例如总蛋白的双缩脲比色法、白蛋白的溴钾酚绿法。 酶法 由特异性的酶来催化反应，在一定波长下比色。例如甘油三酯由甘油激酶和过氧化物酶来催化反应；尿素有脲酶来催化反应进行。 免疫比浊法 抗体（Ab）与可溶性抗原（Ag）反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。这种在沉淀反应中形成的微粒具有特殊的光学性质。 * 终点法 被测物质（反应底物）在化学反应过程中完全被消耗或转换，即反应达到平衡（终点），通过测定产物（反应生成物）的多少来定量测定被测底物的含量。 反应曲线图如下： * 1. 终点法 举例：血糖（Glu） 测定原理： 葡萄糖+O2+H2O 葡萄糖酸+H2O2 H2O2+4-AA+酚 醌亚胺+4H2O 醌亚胺在480~550nm有吸收峰 POD GOD 反应曲线 单试剂 t 双试剂 t 样品加入后一段时间后吸光度达到最大而且不再变化，说明反应完成，这样的项目为终点法。 * 2.速率法 举例：谷丙转氨酶（ALT） 测定原理： L-丙氨酸+?-酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸 丙酮酸+NADP+H L-乳酸+NAD+ NADH在340nm波长下吸收峰下降 ALT LDH 反应进行时的某特定时间间隙内，进行一系列测定记录。在某时间间隔内有效测定其吸光度变化速率是分析浓度的函数。特别是在测定时间间隙内，记录下表现出反应中最佳线性部分的吸光度读数。 * 反应曲线 单试剂 A t 双试剂 A t 双试剂 A t * 3. 免疫比浊 反应原理 透射比浊法：是根据抗原、抗体结合形成的抗原抗体复合物能引起液体介质出现浊度的原理。当抗体过量存在时，与抗原形成复合物。 颗粒增强免疫比浊法：选择一种大小适中，均匀一致的胶乳颗粒，吸附或交联抗体后，透过光减少，这种减少与胶乳凝集成正比。 反应曲线 A t * 反应过程： 抗体：病原体产生的蛋白质。 抗原：机体体液免疫反应的产物，是一种特性的蛋白。 复合物（不溶） 抗原 抗体 平衡 复合物（溶解） 抗原 抗体 抗体过量： 复合物（溶解） 抗体 抗原 抗原过量： 前带现象：当抗原过量，抗体不足反应超限导致沉淀增加，浊度下降的现象 * 举例：载脂蛋白AI(APOAI) 测定原理： 血清中的APOAⅠ与试剂中的特异性抗人APOA抗体相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生混浊，在340nm波长下检测混浊程度（透射比浊）。 试剂组成： A厂家 B厂家 聚乙二醇≤4%（表面活性剂） 表面活性剂 Tris/HCl缓冲液15mmol/L Tris缓冲液 抗人APOA-Ⅰ抗体血清106mmol/L 抗人APO-AⅠ抗体血清 校正液 每批定值（多点定标） 校正液 每批定值（多点定标） 此试剂最关键的成份是抗血清的纯度亲和力及效价 表面活性剂的作用是有助于APOAⅠ抗原位点暴露充分与抗体作用，并有缩短反应时间的作用。 免疫比浊反应曲线特点近似抛物线，最低值偏高，最高值偏低。 * 谢 谢 诸 位 ！ * * * 血浆中总同型半胱氨酸浓度受到多种因素的影响。在特定的病例中，各种因素常常是相互影响的。 * 定义为：当溶液的厚度为1cm，溶液中待测物质的浓度为1mol/l时，该物质在某波长光束的吸光度即为该物质的摩尔消光系数。 ε越大，则检测物质的浓度越小，灵敏度愈高。 对特定物质在特定波长时为特定值。它是一个物理常数。 例如： NADH (NADPH) 在340nm的ε＝6.22 对硝基苯酚在405nm的ε＝18.5 对硝基苯胺在405nm的ε＝9.9 DTNB在405nm的ε＝13.2 * 生化基础知识 斯光明 * 临床生物化学和生物化学检验 研究健康和疾病时的生物化学过程，测定体液或组织的成分以提供对疾病的诊断、治疗和预防有用信息的一门学科。现在还包括研究治疗效果的检测。 研究领域广泛，与临床医学、计算机等联系密切。 * 生物化学的研究领域之一 机体代谢稳定态：生物机体是一个开放的稳态系统，它的成分随膳食、运动和生物节律性等因素影响而处于动态平衡状态。某些物质易于交换，而另