蛋白核酸杂交转印膜(PVDF膜与尼龙膜)介绍.pdfVIP

蛋白核酸杂交转印膜(PVDF膜与尼龙膜)介绍.pdf

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蛋白、核酸杂交转印膜(PVDF、尼龙膜)技术介绍 r e t 转 t 印膜:用于蛋白质和核酸的转移和检验过程的微孔膜。 e Southernblot:又称Southern印迹杂交,是研究DNA图谱的基本技术。 b Northernblot:又称Northern印迹杂交,与Southernblot方法类似,是检测RNA o 的基本技术。 C Westernblot:又称Western印迹杂交,与Southernblot方法类似,是蛋白质检测 分析的基本技术。 转印膜在蛋白质和核酸的转移和检测过程中应用广泛,不同的转印膜规格和参数不同, 选择正确、均一稳定的转印膜对达到最佳的实验结果起到关键性的作用。 常用的转印膜对比: 常用的三种转印膜:硝酸纤维素膜(NC膜)、带正电的尼龙膜(N66膜)、聚偏氟乙 烯膜(PVDF膜)。 三种转印膜结合DNA或RNA的能力:带正电尼龙膜PVDF膜硝酸纤维素膜。 三种转印膜机械强度比较:硝酸纤维素膜较脆,易破碎,不能重复使用;尼龙膜和PVDF 膜机械强度较高,可重复使用。 带正电的尼龙膜可结合短至10bp核酸片段,因此是最理想的核酸杂交转印膜。 PVDF膜机械强度高、耐高温,是蛋白印迹最理想的转印膜。 Cobetter专为蛋白核酸杂交研发了性能优良的转印膜,Cobetter杂交转印膜的种类如 下: r e t t e b o C  N66尼龙转印膜  N66尼龙带正电荷转印膜  PVDF疏水转印膜  PVDF亲水转印膜 Cobetter转印膜孔径有0.45um、0.22um两种。 CobetterN66尼龙转印膜: r e t  相比起硝酸纤维素膜而言,其机械强度高,在经历多次杂交、洗脱和标记后不易产 t 生 e 破损和变形,可重复使用,非常适用于核酸检测。  制 b 模过程中通过特殊的表面改性方法嫁接了亲水性的基团,使用过程中不需要再做 预润湿处理。 o C  通过在膜表面嫁接羟基基团,改变其表面电荷性能(正电),使得其能紧密结合 DNA而降低背景,快速结合DNA。 溶剂兼容性: 能够抵抗普通溶剂,比如丙酮、酒精、氯化脂肪族烃、甲酰胺、2M氢氧化钠、DMSO 以及二甲基甲酰胺。但耐酸能力非常有限,与浓缩蚁酸(50%)、盐酸(4摩尔)、 氧化剂

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