电泳凝胶成像系统.PDFVIP

泳凝胶成像系统 一、仪器照片 二、仪器设备概况 1. 仪器简介： 系统包括PROTEAN 等电聚焦槽，IPG 预制胶条和凝胶成像仪，用于双向电泳的一向和 两向分离，简单，高效重复性好，电泳槽和电源一体化设计，工作电夺力为 10kV ，电流为 2.4mA ，采用Peltier 制冷，10-25℃间精确的温度控制，高容量的操作平台，可容纳24 个7cm 胶条，12 个 11cm 或 12 个 17cm 胶条，增加了产率和效率，一次性的水化盘设计使得水化 后的胶条转移到聚焦盘上变得非常简便，这样，残留的样品缓冲液不会影 电流通过胶条。 胶条在托盘上的安放是对号入座，简化实验操作，可以进行实验方法的编程和实验步骤的及 时增添，具有RS-232 串口，可外接打印机，打印实验方法和数据。 2. 性能参数： CCD 分辨率(H ×V) ：1,392 × 1,040 像素密度：12 位( 4,096 灰度) 像素大小：6.7 × 6.7 动态范围：3 个数量级 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 摄像头冷却系统：Peliter 摄像头冷却温度：-45 ℃ 照明模式：透射紫外光，透射白光、反射白光 激发光源：254， 302， 365 nm 和白光 动态平场扫描技术：有，5% CV 大小(W x D x H) ：60 × 36 × 96 cm 3. 应用范围： 适用于多种检测方法如Immuno-Star HRP，AP 化学发光，SYPRO RUBY ，Cy3 ，GFP， Hoechst，银染，考染等。ChemiDoc XRS 适于要求高分辨率 （双向凝胶电泳） 和高灵敏度 （化学发光western 杂交）的广泛应用，如Western 杂交，核酸检测，2-D 电泳胶等。 4. 面向学科 生物工程、制药工程 5. 联系人 蔡志强 6. 联系电话 62862 三、 仪器设备使用说明和操作规程 1. 等电聚焦： 1）从冰箱中取出冷冻保存的蛋白溶液，室温下充分融解； 2 ）按表2 所列取一定量的蛋白样品，并用样品水化液补足体积至450ul ； 3 ）取出低温保存的胶条 （GE Healthcare ），室温下放置10min； 4 ）在聚焦槽中缓慢加入蛋白样品； 5 ）去除胶条保护膜，分清胶条正负极，胶面朝下缓慢倒压在蛋白溶液中，放置过程中如有 气泡产生，则可以缓慢拖动胶条以赶走气泡； 6 ）在胶条支持膜面缓慢加入2ml 左右覆盖油并盖好聚焦槽盖； 7 ）准备完毕后开始按如下参数设置等电聚焦程序。 温度：20 ℃ 最大电流：50 μA/strip 等电聚焦程序：50V ×12 h （step ）、500V ×1h （step ）、1000V×1h （step ）、1000- 10000 V ×1h （gradient ）、10000V×nh （step ）、500V ×nh （step ） 2. 胶条平衡及SDS电泳： 1）等电聚焦完成后，取出胶条，用半湿滤纸小心吸去胶条表面覆盖油及多余蛋白溶液； 2 ）将胶条放入10ml 平衡缓冲液1 中，室