通用引物多重PCR新技术对番木瓜转基因成分检测的研究.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2016, Vol.32, No.4 通用引物多重PCR新技术对番木瓜转基因成分 检测的研究 1 1 1 1 1 1 1 1，2 白卫滨 ，李宵 ，朱翠娟 ，文罗娜 ，王丽芳 ，卢军利 ，欧仕益 ，孙建霞 （1.暨南大学食品科学与工程系，广东广州 510632）（2.广东工业大学轻工化工学院，广东广州 510006） 摘要：为了满足能够同时对多个靶标进行检测，克服传统多重PCR 的引物间排斥、重现性差等缺点的要求，建立通用引物多重 PCR 新方法对番木瓜中转基因成分进行高效、快速的检测。选用三种转基因番木瓜（Event 55-1、“GM - YK”和“华农一号” ）和非转 基因番木瓜（“ 台农2 号” ）的新鲜叶片为研究对象，根据三种转基因番木瓜的外源基因和内标木瓜蛋白酶基因（papain ）序列，设计 五种特异性引物。通过比较不加入接头的特异性引物的 PCR 验证结果，发现复合引物（带通用接头的引物)无论在单重 PCR 或者多 重PCR 的检测中的电泳条带均更为明亮清晰。而由灵敏度的对比，可以得出通用引物多重PCR 灵敏度比普通引物的灵敏度提高了 1 个数量级。通用引物多重 PCR 新技术较普通多重 PCR 方法检测番木瓜中转基因成分拥有更低的检测限和灵敏度，为转基因成分的快 速检测提供一种新技术。 关键词：转基因；检测；多重 PCR；通用引物； 文章篇号：1673-9078(2016)4-229-234 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.4.036 Detection of Genetically Modified Ingredients in Transgenic Papaya using Universal Primer-multiplex PCR 1 1 1 1 1 1 1 1,2 BAI Wei-bin , LI Xiao , ZHU Cui-juan , WEN Luo-na , WANG Li-fang , LU Jun-li , OU Shi-yi , SUN Jian-xia (1.Department of Food Science and Engineering, Jinan University, Guangzhou 510632, China) (2.Faculty of Chemical Engineering and Light Industry, Guangdong University of Technology, Guangzhou 510006, China) Abstract: In order to meet the need for simultaneous detection of multiple targets and to overcome the several limitations associated with traditional multiplex polymerase chain reaction (PCR) such as primer exclusion, poor reproducibility etc., a novel universal primer-multiplex PC