复旦奥医：牛磺酸对幼鼠脑神经保护作用和机制研究.pdfVIP

维普资讯 营养学报2002年第24卷第1舅 牛磺酸对幼鼠脑神经保护作用和机制研究 肖荣，邱服斌，李秀花，杨 燕，梁 江 (山西医科大学营养与食品卫生教研室，太原 030001) 【摘 要】目的 观察牛磺酸(Tau)对幼 鼠脑神经为保护作用，并对其可能机制进行探讨。方 法 雁0．1~mol／L亚硒酸钠与不同浓度的Tau共 同加入到原代培养2d的新生小鼠大脑皮质神 经元中，用MTT检测和DNA片段琼脂糖凝胶 电泳法分析其保护性作用；并选用建康清洁毅、断乳 SD雌鼠32只，按体重随机分为4组，分别饲子补充不同水平Tau的实验饲料，观察对照组及补充 Tau组幼鼠脑发育及代谢 的影响。 结果 1．Tau可明显提高神坚元 的存活率；2．一定浓度的Tau 可阻断或部分阻断由亚硒酸钠诱导的典型DNA梯型；3．Tau可促进脑细胞的增殖活性，增加脑 重；4．补充Tau能明显提高脑Tau积累、蛋 白质和AChE水平，且有一定的剂量反直关系。结论 补充Tau具有较强的神经保护作用，可能是通过改变某些蛋白质印某些基因的表达而实现的。 关薯词 ：牛磺酸； 培养神经元； DNA片段 四甲基儡氯唑盐分析} 脑发青 中国分类号：R151．43 文献标识码：A 文章编号 ： 0512—7955(2002)01—0005—04 牛磺酸(taurine，Tau)一直被认为是具有多种 参照Yan“方法进行新生小鼠大脑皮质细胞培 生物学功能的物质。随着现代分子神经营养学研究 养，加入 0．1~mol／L亚硒酸钠 (sodium selenite， 手段的应用，已确立了牛磺酸在大脑发育过程中有 Sigma产品)和 Tau(Sigma产品)，24h后收获细 神经营养因子和神经保护性因子的地位，但其机制 胞。实验分 5组：(1)对照组(Con)、(2)亚硒酸钠组： 尚未完全阐明。Chen等在人胚神经细胞培养研究中 0．1vmol／L亚硒酸钠、(3)低剂量组：0．1~mol／L 证明，加入Tau可增加神经元DNA和蛋白质的合 亚硒 酸钠 +lmmol／LTau、(4)中剂量组：0．1 成代谢，促进细胞的增殖和分化 。[1Idrissi等人的 vmol／L亚硒酸钠+4mmol／LTau以及 (5)高剂量 研究表 明，牛磺酸具有拮抗兴奋性氨基酸一一 谷氨 组：0．1vmo|／L亚硝酸钠+8mmol／LTau。 酸对新生小脑颗粒细胞的毒性作用，是通过调节 1．2 四甲基偶氮唑盐分析 (MTT)法检测细胞的增 ECa ](i)和线粒体能量代谢而实现的 ]；近年又有 殖 人提出牛磺酸在调节多种细胞凋亡的发生中起关键 分离新生小鼠大脑皮质细胞，培养在 96孔板中 性作用 3【]，如牛磺酸可明显地阻止亚砷酸钠诱导的 (5000个细胞 ／孔)，37℃下，分别孵育 30rain或 中性粒细胞和 内皮细胞凋亡，抑翩CCL 诱导的肝 5h，加入 MTT[3，一(4，5-dimethylthiazoly1)一2，5一 细胞凋亡等。本研究旨在探讨牛磺酸对幼鼠脑神经 diphenyltetrazoliumbromide]与 DMSO(dimethyl 细胞保护性作用的可能机制与特点。 sulphoxide)再孵育，震荡，于酶标仪 (Bi0一RadLab) 测OD s进行准确定量。实验分组同原代培养。 1 材 料 与 方 法 1．3 琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯型 1．1 原代培养 提取对照组和三个实验组的神经元 DNA片 段，并进行DNA梯型检测 杖稿 日期j2000-11—06 1．4 动物 暮盘砸 目：山西省 自然科