第三章 植物化学成分的分离和纯化.ppt

《功能性食品学》第三章 第三章 植物化学成分的分离和纯化 第一节 植物化学成分的初步分离方法 　一、各种分离方法 　　 分离是根据提取物中各成分之间的物理或化学性 质的差异，运用一定的方法使各成分彼此分开的过程。 　　常用的分离法有：系统溶剂分离法、两相溶剂萃 取法、沉淀法、盐析法、透析法、结晶法和色谱法等。 　　重点掌握：两相溶剂萃取法、结晶法、色谱法。 （一）溶剂处理 利用植物化学成分在不同极性溶剂中的溶解度进行 分离纯化。 一般将总提物选用3~4种不同极性的溶剂，由低级 性到高极性分步进行提取分离。 （二）两相溶剂萃取法 　　原理：利用混合物中各单体组分在两相溶剂 中的分配系数（K）不同而达到分离的方法。 　　　 1、简单萃取法：一般在水和亲脂性有机溶剂中进 行，根据情况，也可用酸水或碱水。 常用的萃取剂：石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇 简单萃取在操作中应注意： 1） 由于含有具有乳化性质的成分，萃取时易产 生乳化现象。故要破乳： 2） 水提取液的浓度最好在比重1.1~1.2之间，过稀 则溶剂用量太大。 3） 第一次萃取时，溶剂量一般为水提取液的1/3 ， 之后用量在1/4~1/6。 4） 一般萃取3~4次即可。 小量萃取时，用分液漏斗即可完成；大量萃取时， 工业上多在密闭萃取罐内进行。 2、逆流连续萃取法：利用提取液与萃取剂的密度 的差异，使密度小的液体为移动相（分散相），连续 穿过密度大的作为固定相（连续相）的液体，借以将 提取液中某些成分“转溶于”萃取剂而达到分离。 　　3、逆流分配法（CCD）：是将混合物在一定量的两相溶剂中，经多次移位萃取分配而达到分离的方法。 操作时间长且麻烦，用量大。 （三）沉淀法 是在提取液中加入某种试剂使产生沉淀，以获得有 效成分或除去杂质的方法。依据加入试剂或溶剂的不 同，可分为以下四种方法： 1、溶剂沉淀法：指在溶液中加入另一种溶剂以改变 混合溶剂的极性，使一部分物质沉淀析出，从而实现 分离。 水提醇沉法：可使多糖、蛋白质沉淀 醇提水沉法：可沉淀亲脂性成分 2、酸碱沉淀法：是利用酸性成分在碱中溶解，在 酸中沉淀；而碱性成分则在酸中溶解，再建中沉淀的 性质，来进行分离的方法。 酸提碱沉：用于生物碱的提取分离。 碱提酸沉：用于酚、酸类成分和内酯类成分的 提取、分离。 3、铅盐沉淀法：利用中性醋酸铅或碱式醋酸铅在 水或稀醇溶液中能与许多物质生成难溶的铅盐或络盐 沉淀而分离的方法。 中性：沉淀具有邻二酚羟基和羧基的成分 碱式：沉淀含酚羟基、羧基和中性皂苷 4、特定试剂沉淀法：某些特定试剂能选择性与某 类化学成分反应生成可逆的不溶性沉淀，借以与其他 化合物分离。 　　例如：雷氏铵盐能与水溶性生物碱类生成沉淀， 可用于分离水溶性生物碱与其它生物碱；胆甾醇能和 甾体皂苷沉淀，可使其与三萜皂苷分离；明胶能沉淀 鞣质，可用于分离或除去鞣质等。 （三）盐析法 是在药材的水提取液中加入无机盐之一定浓度，或 达到饱和状态，使某些成分在水中的溶解度降低而沉 淀析出，而与水溶性较大的杂质分离的方法。 　　　常用的无机盐： HCl、Na2SO4 、 MgSO4 　　例如：三七的水提取液中加入硫酸镁至饱和状 态，三七皂苷乙即可沉淀析出。 （四）结晶法 　　利用混合物中各成分在某种溶剂或某种混合溶剂 中的溶解度不同来达到分离的方法，是分离和精制固 体化学成分最常用的方法。 　　结晶：从不是结晶状物质处理得到结晶状物质的 过程。 　　重结晶：从较不纯的结晶经处理得到较纯的结晶 的过程。 　 分布结晶：结晶后的母液经处理又可得到第二批、 第三批结晶的方法。　 　 1、结晶溶剂的选择 　　1） 溶剂在冷时对所需成分溶解度小，而热时溶 解度大。 　　2） 溶剂的沸点不宜太高，一般在30~150 ℃，常 用甲醇、丙酮、氯仿等。 3） 溶剂与欲结晶的成分不发生化学反应。 4）尽可能安全、廉价、易得。 2、结晶法的操作步骤： 3、结晶纯度的判断 1）结晶形态和色泽：都有一定的晶形和均匀的色 泽。 2）熔点和熔距：结晶一般都有一定的