十二烷基苯磺酸钠与过氧化氢酶、胰蛋白酶毒性相互作用研究.docVIP

　　十二烷基苯磺酸钠与过氧化氢酶、胰蛋白酶毒性相互作用研究 第一章绪论 1研究背景 随着经济社会的不断发展，越来越多的生产、生活废弃物排放到环境中，导致环境污染问题日益加重，对人体的健康造成了极大危害。污染物按照其性质分类，可分为物理污染物、化学污染物和生物污染物。物理污染物主要包括光、噪声、放射性物质等，化学污染物主要包括无机污染物（如重金属、硫化物、氮氧化物等）和有机污染物（如甲酸、多氯联苯、二嚼英等），生物污染物主要包括病毒、细菌等⑴。环境中的污染物通过人体的呼吸系统、消化系统以及皮肤等途径进入体内，与体内的蛋白质、核酸等生物大分子相互作用，破坏或影响其生物功能，威胁人体健康。目前，对环境污染物的毒性作用机理研究，已成为环境与健康领域的重要研究课题。环境污染物的毒理研究是环境科学、生物学和医学学交叉发展形成的新兴研究领域，主要利用毒理学的基本原理和研究方法，从生物学的角度，研究环境污染物及其在环境中降解、转化产物对生物有机体健康的影响，阐明污染物在生物体内的作用机理，评价环境污染物的毒性，对于疾病的早期诊断、预防和消除由环境污染引发的健康问题具有重要作用。 .. 2蛋白质介绍 蛋白质是由多种氨基酸按照一定的顺序通过肽键脱水缩合形成的，具有较为稳定构象的一类生物大分子。它是生物功能的执行者，是生物体的重要组成成分，是生命赖以生存的物质基础。蛋白质由氨基酸（含有氣基的幾酸）组成，组成蛋白质的20余种氨基酸中，除了脯氨酸（Pro)以为，其他氨基酸均为a-氨基酸（a-碳原子上的氢原子被氨基取代），分别为：丝氧酸（Ser)、苏氨酸（Thr)、天冬酰胺（Asn)、谷氨醜胺（Gin)、酪氨酸（Tyr)、半腕氨酸（Cys)、天冬氨酸（Asp)、谷氨酸（Glu)、组氨酸（His)、赖氣酸（Lys)、精氨酸（Arg)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸（Ala)、缴氨酸（Val)、亮氨酸（Leu)、异亮氨酸(lie)、苯丙氨酸（Phe)、甲硫氧酸（Met)、色氨酸（Trp)。根据氨基酸侧链的化学结构分类，可分为：脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、杂环氨基酸、杂环亚氨基酸；根据氨基酸侧链的极性分类，可分为：极性氣基酸和非极性氨基酸[2]。蛋白质中的氨基酸主要通过肽键链接，由不同氨基酸的幾基和氨基脱水缩合形成的化合物为肽，所形成的键为肽键。有些肽在生物体内具有特殊的功能，如激素肽、神经肽等活性肽，在沟通细胞内部和细胞间的信息上具有重要作用。蛋白质的结构可分为四级[3]。一级结构是指蛋白质中氨基酸残基的排列顺序。氨基酸残基的排列顺序对蛋白质功能和高级结构的构成起到重要作用，目前己测出两千多种蛋白质的氨基酸顺序，形成了蛋白质数据库。二级结构是指蛋白质中多肽链自身的折叠和盘绕方式，包括：a-螺旋、0-折叠、0-转角、无规则卷曲。a -螺旋的形成和稳定性与氨基酸组成和序列有关，还与是否同时带有相同电荷的氨基酸有关。P-折叠是肽键相当伸展的一种结构，当a -螺旋被拉长时，氛键破坏，就会转变为P -折叠。P -转角是由氨基酸之间的氢键作用，在多肽链上出现的180deg;回折，广泛存在于球状蛋白质中。无规则卷曲是指没有规律的松散肽键结构。三级结构是指蛋白质中多肽链上的所有原子在三维空间中的分布，是由多肽链在二级机构的基础上进一步折叠，盘绕形成的紧密、近似球状的结构构象。其中心多通过疏水作用形成，来稳定蛋白质的三级结构。四级机构是指由两条或两条以上各自独立且具有三级结构的多肽链通过次级键相互缔合而成的蛋白质结构。 第二章十二烷基苯磺黢钠与过氣化氧酶相互作用的研究 1前言 过氧化氢酶（Catalase，CAT)是一种广泛存在于生物体内的氧化还原酶，能够催化分解动植物和微生物体内因新陈代谢产生的H2O2，消除H2O2在生物体内的过度积累而造成的氧化应激伤害[35]。环境污染物的摄入可能会降低生物体内过氧化氢酶的活性，造成H2O2对生物体产生损伤，目前已有研究报道过体内H2O2浓度升高是诱发糖尿病、癌症、高血压等疾病的重要原因。研究环境污染物与CAT的毒性相互作用机理，能够更加深入的了解污染物对生物体带来的危害。本章在模拟生理条件下，采用焚光发射光谱、同步焚光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、酶活性测定和分子对接模拟（MOE)等手段，通过对SDBS与CAT的结合常数、结合位点数、热力学参数的计算，对结合方式、相互作用力类型加以判断，从分子水平上阐述了 SDBS与CAT的相互作用机理。 . 2实验部分 2.1实验仪器 F - 4600焚光分光光度计（日本日立公司HITACHI)； UV - 2450紫外可见分光光度计（日本岛津公司SHIMADZU)； J-810圆二色光谱仪（日本分光公司JASCO)； pHs-3C型酸度计（上海鹏顺科学仪器有限公司)。 2.2实验试剂 过氧化氢酶（