选修3_动物细胞培养(二课时).pptVIP

细胞工程的概念： 应用细胞生物学和 的原理和方法，通过 水平或 水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的 或获得 产品的一门综合科学技术。根据操作对象的不同，分为 工程和 工程。 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 那么动物细胞常用的技术手段呢？ 简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 一、动物细胞培养 从动物机体内取出相关的组织，将它散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 培养器皿 细胞贴壁过程 原代培养 (primary culture) 定义：把第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。 传代培养 (subculture) 定义：当原代培养的细胞生长停止，这时如果要使细胞继续生长，就要及时用胰蛋白酶等，使细胞从瓶壁上解离下来，然后加入新的培养液，将细胞分离稀释，并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内，这个过程称传代培养 原代培养与传代培养 动物细胞培养条件总结： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 请举出动物细胞培养应用的实例  动物细胞特点： 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄，这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含有保持物种遗传性所需的全套基因，而且并没有因细胞分化而丢失基因，因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性。 多莉羊的培育过程 胚胎移植－动物幼体产出概率＜10％ 克隆动物存在着健康问题。例如：许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。 克隆动物的食品安全性问题存在争议 有关概念 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 卵黄膜 2.2体细胞核移植的过程： 思考： 1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？ 2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？ MⅡ中期卵母细胞 诱导方法：物理或化学方法激活受体细胞，完成细胞分裂和发育进程。 3.原理： 4.为什么选择卵母细胞作为核移植的受体细胞？ 细胞核的全能性 卵母细胞体积大、易操作，含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。 1 4 3 2 例.在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到（ ） A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术 D 供体细胞（供核） 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质） 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 构建重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 归纳: 共分成两大阶段：核移植和胚胎移植。 你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 克隆动物的性别取决于？ 思考： 为什么用去核卵母细胞作为体细胞核的受体？ 1、卵母细胞体积大，易操作 2、卵母细胞的成熟促进因子的活性最高 3、卵母细胞的细胞质已成熟，支持胚胎的全程发育 为什么“将供体细胞注入去核卵母细胞”而不是“将供体细胞的细胞核注入去核卵母细胞”？ 体细胞核移植技术最初是用玻璃微型吸管将供体细胞的细胞核吸出，再注入到去核卵母细胞内，后来发展出了另外一种方法，即直接将供体细胞注入到去核卵母细胞透明质内，然后用病毒介导或者电脉冲等方式使两个细胞融合，因为这种方法操作简便，对卵母细胞损伤较小，现在较为常用，多莉羊的产生就是用的这种方法. 如注入的是供体细胞，为什么叫“核移植技术”？ 因为供体细胞的细胞核拥有完整的遗传信息，对后代的性状表达起决定性的作用，线粒体DNA编码的基因很