表皮生长因子对人毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞增殖、迁移能力的作用.pdfVIP

目 录 1 表皮生长因子对人毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞增殖、迁 移能力的影响………………………………………………】 1．1中文摘要………………………………………………………1 1．2英文摘要………………………………………………………4 1．3前言……………………………………………………………7 1．4材料与方法…………………………………………………10 7 1．5结果…………………………………………………………1 1．6讨论…………………………………………………………22 1．7结论…………………………………………………………29 1．8参考文献……………………………………………………30 1．9英汉缩略词对照表…………………………………………34 2 致谢…………………………………………………………35 3 毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞与白癜风(综述)………36 表皮生长因子对人毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞增殖、迁 I ㈣必 移F挈摘 要 f叫‘!y55 目的： 观察不同浓度的表皮生长因子(Epidermalgrowth root factor，EGF)对毛囊外毛根鞘(outsheath，0RS)无色素性黑 ic 素细胞(amelanot 影响。方法：与头皮提供者沟通获得同意后。取头皮并去除脂肪组织 及真皮上1姗。采用1％分散酶II消化获得毛囊。再采用0．5％胰蛋白 酶消化获得外毛根鞘细胞。在含有经Chelex100钠形式螯合后的胎 牛血清的专用McDBl53培养基中原代培养。采用差胰酶法传代纯化 AMMC细胞。将纯化并传至第三代的细胞，用免疫组织化学染色法鉴 10ng／m1、20ng／ml、50ng／m1浓度EGF干预组。(1)按照分组条件 48小时后。采用CCK8检测法检测各组 采用不同浓度EGF干预A删C 细胞的增殖能力。(2)将上述经鉴定后的第三代的AMMC，用无血清 MCDBl53饥饿24h后，采用Transwell体外小室迁移实验检测不同 浓度EGF干预A删C48小时后各组细胞的迁移能力。所测得的结果用 ；±s统计，应用11．5版本的SPSS统计软件，行单因素方差分析。 确定检验水准为尺0．05。结果：人毛囊外毛根鞘的无色素性黑素细 100钠形式螯合后的胎牛血清以及各种添加因子 胞在含有经Chelex 的专用McDBl53培养基中可以有效的扩增。通过采用差胰酶法传代 A埘C细胞可以有效的纯化A删C。A删C在体外能够连续、稳定的传代。 传至第三代的细胞，用免疫组织化学染色显示其NKI／beteb染色阳 0．1968±O．1763，lng／m1 EGF EGF干预组0．7414±0．2177， 干预组0．6302±0．2292，20ng／ml 50ng／ml EGF干预组 10ng／／mlEGF干预组、20ng／mlEGF干预组、50ng／ml EGF干预组、 EGF干预组的0D值低于10ngJ／ml (尸均O．05)。1ng／m1 EGF干预组(尸均0．05)。空白对 20ng／mlEGF干预组、50ng／m1