胶原凝胶构建神经组织工程支架的实验研究 - 中国修复重建外科杂志.pdf

• 0 • Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery, Mar. 2017, Vol. 31, No.3 ·· 胶原凝胶构建神经组织工程支架的实验研究 1 2 1 1 3 1 储成艳 ，朱亮，王苏平，蓝晓艳，秦华民，李深 1. 大连医科大学附属大连市中心医院神经内科（辽宁大连  116023 ） 2. 大连医科大学基础医学院（辽宁大连  116044 ） 3. 大连医科大学附属第二医院病理科（辽宁大连  116027 ） 【摘要】   目的    研究胶原凝胶支架与大鼠 BMSCs 的生物相容性及其对 BMSCs 增殖和分化的影响，探讨其 作为神经组织工程支架的可行性。方法    利用Ⅰ型胶原制备胶原凝胶支架。采用密度梯度离心法分离培养大鼠 BMSCs ，取第 5 代细胞制备胶原凝胶-BMSCs 复合体。采用扫描电镜、HE 染色观察胶原凝胶支架的形态结构及复 合培养后细胞形态；MTT 检测该支架对 BMSCs 增殖的影响。取绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP ）阳 + 性（GFP ）BMSCs 于胶原凝胶支架中培养 24 h ，通过激光共聚焦显微镜及活细胞工作站观察细胞生长及与材料的 + 黏附情况。结果    激光共聚焦显微镜及活细胞工作站观察示，GFP BMSCs 均匀分布于胶原凝胶支架内，大部分 + GFP BMSCs 呈梭形，部分细胞伸出突起，部分细胞间形成连接，提示 BMSCs 在三维空间中生长良好。扫描电镜 示胶原凝胶支架为多孔纤维网状结构，BMSCs 可黏附于该支架材料上，细胞形态良好。MTT 检测示，BMSCs 于 胶原凝胶支架中培养后 3、5、7 d 的吸光度（A ）值均高于单纯 BMSCs 培养，其中 5、7 d 时组间差异有统计学意义 （t=4.472，P=0.011 ；t=4.819，P=0.009）。HE 染色示，胶原凝胶支架呈均质淡粉染细丝样物质。BMSCs 在胶原凝胶 内培养 24 h 后均匀分布其中；7 d 时 BMSCs 形态多样，部分细胞伸出细长突起，具有体外培养的神经元样形态。 结论    胶原凝胶支架制备简便，具有良好的生物相容性，可作为神经组织工程支架材料。 【关键词】  神经组织工程；胶原凝胶；支架材料；生物相容性；BMSCs ；大鼠 Construction of neural tissue engineering scaffold by gelatinous collagen 1 2 1 1 3 1 CHU Chengyan , ZHU Liang , WANG Suping , LAN Xiaoyan , QIN Huangming , LI Shen 1. Department of Neurology, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian Medical University, Dalian Liaoning, 116033, P.R.China 2. College of Basic Medical Sciences, Dalian Medical University, Dalian Liaoning, 116044, P.R.China 3. Department of Pathology, the Second Affiliated Hospital, Dalian Medical University, Dalian Liaoning, 116027, P.R.China Corresponding author: LI Shen, Email: listenlishen@ 【Abstract 】 Objective    To investigate the biocompatibility of type Ⅰcoll