黑曲霉葡萄糖酸发酵的工艺控制方法.pdfVIP

亿 与生物 互程 2008，VoI．25 No．6 固 Chemistry Bioengineering 黑曲霉葡萄糖酸发酵的工艺控制方法 蔡 皓 ，余 超 。。李 庆。 (1．华中农业大学生命科学技术学院，湖北 武汉 430070；2．华东理工大学生物工程学院，上海 200237； 3．华中农业大学理学院，湖北 武汉 430070) 摘 要：针对葡萄糖酸生产茵——黑曲霉，在 1O L发酵罐进行了其发酵工艺控制研究。结果表明，高含量葡萄糖对 黑曲霉生成葡萄糖酸没有抑制作用，较好的葡萄糖控制方式为维持葡萄糖含量2O 左右，总糖含量为 3O 。流加3O NaOH溶液、流加 25 ～3O Ca(OH) 乳浊液、分批添加 CaCO3等3种方式都能很好地控制pH值，但各有适用范围； 通过调整搅拌转速的方式维持溶氧含量5O 左右，可提高产葡萄糖酸性能，并能降低搅拌能耗。 关键词：黑曲霉；葡萄糖酸；发酵；底物抑制；pH值控制；溶氧；含量 中图分类号：TQ 921．2 文献标识码：A 文章编号：1672—5425(2008)06—0063～04 葡萄糖酸及其盐类广泛应用于食品、化工、水处 葡萄糖酸摇瓶发酵研究的基础上，又对其1O L发酵罐 理、建材和医药工业_1]。目前葡萄糖酸生产包括化学 发酵工艺控制进行了研究。 催化法、电解法和发酵法。 l 实验 1880年，Boutroux首先发现利用微生物的氧化作 用能将葡萄糖氧化成葡萄糖酸。1924年，Bernhager 1．1 材料和仪器 发现采取添加碳酸钙中和酸的方法，黑曲霉菌能高效 1．1．1 菌种 地将葡萄糖转化成葡萄糖酸。1933年，Currie等利用 黑曲霉(Aspergillus niger)，购于武汉大学菌种 青霉或曲霉采用现代通气搅拌深层发酵技术，在48～ 保藏中心。 60 h内葡萄糖的转化率达 90 9／5。1952年，Blom等发 1．1．2、培养基 明了添加NaOH、维持pH值 6．5以下的方法生产葡 (1)查氏培养基(g·L )：蔗糖 30，NaNO。4， 萄糖酸钠，葡萄糖转化率达95 以上，发酵时间缩短 MgSO4·7H2O 0．5，KC1 0．5；FeSO4 0．1，K2HP04 1， 到20 h以内，这种工艺形成了现代工业深层发酵的基 琼脂20，pH值5．5，温度31℃。 础。1999年，黄道震等 以葡萄糖含量为30 9／6的发酵 (2)种子培养基(g·L )：葡萄糖(水解糖)40，麸 培养基接种10 的黑曲霉种子液，通气、220 r·min 皮 32，(NH4)2HPo4 0 4，KH2Po4 0．2，MgSO4· 搅拌、流加氢氧化钠溶液控制pH值 6 0～6．5、温度 7H2O 0．2，CaCO3 10，PH值5．6。 32～34 oC、发酵 20 h，残糖可降至 1 g·L 以下。 (3)发酵培养基(g·L )：葡萄糖(水解糖)100 2002年，Anastassiadis等[3 利用筛选得到的短梗霉 ～ 300，(NH4)2 HPO4 0．4，KH2 PO4 0．2，MgSO4· (Aureobasidium pullulans)在连续式搅拌发酵罐中进 7H2O 0．15，CaCO327～81，pH值5．6。 行了静息细胞和固定化细胞的葡萄糖酸连续转化实 1．1．3 主要仪器 验，葡萄糖酸浓度可达 260 g·I _。，最高生成速率为 SHZ一82型恒温振荡器，金坛市富华仪器有限公 19 g·L一 ·h一。 司；SKP-01B型电热恒温箱，湖北黄石恒丰医疗器械 作者曾参与化学法年产 5000 t葡