2018版高考生物大一轮复习 第十二单元 现代生物科技专题 第42讲 基因工程及其安全性学案.docVIP

第42 　1.基因工程的(Ⅰ)　2.基因工程的原理及技(含PCR技)(Ⅱ)　3.基因工程的(Ⅱ) 4．蛋白(Ⅰ)　5.实验：DNA的粗提取与 　基因工程的操作工具 1．基因工程的概念理解 (1)供体：提供目的基因。 (2)操作。 (3)操作水平：DNA分子水平。 (4)原理：基因重。 (5)受体：表 (6)本性受体生物体 (7)优克服障 2．DNA重 (1)限制性核酸(简称：限制酶) ①来源：主要是原核生物中分离 ②作用：识别双链DNA分子的某种特定核，并使每 ③结果：产生黏性末端或平末端。 (2)DNA 项目 E·coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 大 T4噬菌体 功能 连接黏性末端和平末端 恢复被限制磷酸二酯 (3)载体 ①常用载体： ②其他载体：λ噬菌体的衍生物、 ③具备的条件 a．能在宿主 b．有一切割位 c．具有特殊的因，以便 ④作用 a．作， b．利用它在宿主 1．限制性核酸(限制酶) (1)识别序列的特点：呈，以中心线为轴，两侧碱基互补对称；以 (2)切割后末端的种 (3)限制 ①根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类 a．应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，如PstⅠ。 b．不能SmaⅠ。 c．PstⅠ和EcoRⅠ(但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点)。 ②根据质粒的特点确定限制酶的种类 a．所 b．质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所 2．限制DNA连接酶的关系 (1)限制DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。 (2)限制DNA的原因是原核生物中不存在 (3)DNA连接酶起作用时，不需要模板。 3． 载体上的标记基因一般是一些抗生素的抗性基因。目的基因要转入的受体细胞没有抵抗相关抗生素的能力。当含有抗生素抗性基因的载体进入受体细胞后，抗性基因在受体细胞内表达，使受体细胞能够抵抗相应抗生素，所以在受体细胞的培养体系中加入该种抗生素就可以只保留转入载体的受体细胞，原理如图所示： 关于基因工程工具的几个易错点 (1)限制 (2)限制 (3)在切割目的基因和 (4)将一个基因从DNA分子上切割下4个黏性末端或平末端。 (5)不同DNA分子用同一种限制DNA分子用不同的限 (6)基因工程中的DNA分子能 (7)基因工程中有3种工具但工具2种。 1．(2016·高考全40)某一DNA插入到Ampr或Tetr中(Ampr表示氨Tetr表示四)。有人将此质粒载体用BamH Ⅰ酶切后，与用BamH Ⅰ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重 (1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有__________________________________(答出)， 而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。 (2)如果用含有氨________________________________________________________________________ ____________________________；并且和的________________________________________________________________________。 在上述的固体培 (3)基因工程中，某些噬菌体DNA复制所需的原料。 解析：(1)作(2)未被的培BamH Ⅰ切割(3)噬菌体DNA复制所需原料 答案：(1)能自我复制、具有(2)二者均不含有氨重(或答含有重组质粒)　二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长　四环素　(3)受体 2．(2016·高考全40)图(a)中的三DNA片段上依次表示出了EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ三种限制性(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoR Ⅰ、Sau3A Ⅰ的切)。 根据基因工程的有 (1)经BamH Ⅰ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接，理由是________________________________________。 (2)若某人利用(b)所示的表(c)所示。，不能表________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________。 (3)DNADNA片段和