探讨不同品种酵母菌中热休克蛋白90 与粒线体在种化 - 市立北一女中.pdf

探討不同品種酵母菌中熱休克蛋白 90 與粒線體 在種化扮演的可能角色 研究者：朱芷儀、許真榕 指導者：呂俊毅教授 許博琛博士 孫譽真老師 壹、 緒論 一、摘要 最近研究指出，不同酵母菌種間細胞核基因與粒線體基因的不相容會造成雜交 後代不孕；另一研究顯示，兩不同品種酵母菌Sc 、Sb (註 1)中，某些遺傳基因的表 現差異，會隨熱休克蛋白90 (Hsp90)的表現量而有所變化。因此本研究假設，Hsp90 的功能和兩新生物種間的生殖隔離之形成或維持可能存在關聯。透過觀察Sc 、Sb 及 兩物種衍生之雜交種抑制Hsp90 活性後生長曲線，探討Hsp90 的緩衝作用與基因不 相容之關聯 ，藉由觀察雜交種與純種ρ0 + (註2)與ρ 的生長曲線，探討粒線體功能的 有無是否特別影響雜交種在抑制Hsp90 後的生長情形。研究結果發現，高溫下抑制 0 + Hsp90 使雜交種 ρ 生長得較ρ 佳，因此推論失去粒線體功能，會使Hsp90 對雜交種 的重要性降低，而抑制 Hsp90 活性後產生的細胞生長抑制，可能經由粒線體產生， 因此Hsp90 可能緩衝因基因不相容造成之對細胞有害的交互作用。最後藉由觀察帶 Sc 或Sb 粒線體的雜交種，比較帶不同品種粒線體是否影響雜交種生長情形。 註1. Sc ：Saccharomyces cerevisiae (釀酒酵母) ；Sb ：Saccharomyces bayanus 0 + 註2. ρ ：petite ，粒線體缺陷(缺少DNA)的細胞 (反之則為ρ ) 二、研究動機 生殖隔離是物種演化重要過程，從最近的研究中我們看到，置換染色體基因的 酵母菌細胞無法生長在以甘油為主要碳源的培養基中，因此推測該置換株孢子形成 的缺陷可能是因為其呼吸作用的功能有問題所造成，再藉由研究細胞核基因 AEP2 與粒線體基因OLI1 ，發現不同酵母菌種間細胞核基因與粒線體基因的不相容性會造 成雜交後代的不孕 (李信毅、周睿鈺，2008) 。而另一篇研究顯示，在兩個不同品系 酵母菌中，某些遺傳基因的表現差異，會因熱休克蛋白Hsp90 表現量的變化而有所 改變，因而反映出不同「遺傳緩衝效應」(註1)的結果 (謝侑穎，2009) 。因此，我們 假設Hsp90 的功能和兩新生物種間的生殖隔離之形成或維持可能存在關連，決定研 究Hsp90 的功能和粒線體與種化之可能關係。 註1 ：生物體中能夠隱藏基因型的變異，並維持表現型穩定之生理機轉 280 三、簡介 (一) 種化 (speciation) 泛指物種經演化一分為二的過程。生物學上「物種」最簡單的定義為 一類在形態與遺傳組成上相似的生物群體中，具生殖能力的個體能自然交 配，產生有生殖能力的後代。種化的原動力包含自然因素：突變、天擇、 遺傳漂變等，和人為因素：人工培育及基因重組。依地理關係可分類為異 域、同域、邊域和臨域種化四類，依生殖隔離分類則可分成合子前與合子 後隔離。 (二) 生殖隔離 (Reproductive Isolation) 生物擇偶時傾向與自己同種的個體交配，並拒絕與非同種交配，稱為 生殖隔離機制。分為合子前與合子後隔離，造成合子前隔離因素有地理環 境隔離、交配季節差異等；合子後隔離則指雜交之後代無法存活，或生殖 能力低下、環境適應力