重组旋毛虫53 000 抗原蛋白通过激活m2 型巨噬细胞减轻脂多糖对 .pdf

·534 · 中华危重病急救医学2014年8月第26卷第8期 ChinCritCareMed，August2014，Vol.26，No.8 ·论著· 重组旋毛虫53000抗原蛋白通过激活M2型 巨噬细胞减轻脂多糖对肝脏的损害 陈志斌 唐皓 李振宇 梁艳冰 吴敬国 曾丽金 杨青 梁华平 马中富 【摘要】 目的 研究重组旋毛虫53000抗原蛋白（rTsP53）是否通过激活M2巨噬细胞减轻脂多糖（LPS） 所致肝损害。方法 60只雄性BALB/c小鼠，按随机数字表法分为LPS组、LPS+磷酸盐缓冲液（PBS）组及 rTsP53干预组，每组20只。3组动物禁食8 h后腹腔注射15滋g/kgLPS；LPS+PBS组在注射LPS后1h注射等 量PBS；rTsP53干预组在注射LPS后1h注射5mg/kgrTsP53蛋白。干预后48h处死小鼠，提取腹腔巨噬细胞， 用流式细胞仪检测巨噬细胞标志物CCR7（M1型）及CD206（M2型）表达变化；取肝脏组织制作切片，苏木素- 伊红（HE）染色观察病理改变，双染色免疫荧光检测F4/80（+）HLA-DR（+）及F4/80（+）CD163（+）表达情况；取 外周血，检测血清天冬氨酸转氨酶（AST）及丙氨酸转氨酶（ALT）水平。结果 与LPS组、LPS+PBS组比较， rTsP53干预组小鼠生存率明显提高（90%比25%、30%，均P＜0.01）；肝脏病理损害减轻，组织结构明显改善； 血清ALT、AST水平明显降低〔ALT（U/L）：97.7±8.5比181.7±19.5、173.7±17.2，AST（U/L）：142.7±12.1比 235.7±9.9、213.7±6.7，均P＜0.05〕；腹腔巨噬细胞FITC-CD206（+）比例明显升高〔（17.75±0.30）%比（1.38± 0.13）%、（1.36±0.05）%，均P＜0.05〕，腹腔巨噬细胞PE-CCR7（+）比例明显下降〔（6.89±0.11）%比（15.30± 0.64）%、（14.96±0.93）%，均P＜0.05〕；肝组织切片内F4/80（+）CD163（+）细胞表达荧光强度明显增强（0.36± 0.01比0.29±0.02、0.31±0.01，均P＜0.05），而F4/80（+）HLA-DR（+）荧光强度则无明显差异（0.30±0.01比 0.30±0.02、0.31±0.01，均P＞0.05）。LPS组与LPS+PBS组各指标比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。 结论 rTsP53蛋白可以通过促进体内M2型巨噬细胞活化，减轻LPS所致肝组织损害，提高动物生存率。 【关键词】重组旋毛虫53000抗原蛋白； M2型巨噬细胞；脂多糖； 肝损害 Recombinant trichinella spiralis-53 000 protein alleviates liver damage due to lipopolysaccharides via M2 macrophage activation Chen Zhibin* ，Tang Hao ，Li Zhenyu ，Liang Yanbing ，Wu Jingguo ，Zeng Lijin ，Yang Qing ，Liang Huaping ，Ma Zhongfu. * Department of General Internal Medicine ，the First Affiliated Hospital of Sun Yet-Sen University ，Guangzhou 510080 ，Guangdong ，China Corresponding author ：Ma Zhongfu ，Email ：1362670488@ 【Abstract 】 Objective To evaluate if recombinant trichinella wpiralis-53 000 protein （rTsP53）could alleviateliverdamagecausedbylipopolysaccharides （LPS）viaM2macrophageactivation. Methods Sixtymale BALB/cmicewererandomlydividedintoLPSgroup，LPS+phosphatebuffersaline （PBS）group and rTsP53 interventiongroupbyrandomnumbertable，with20miceineach