trfl 219位磷酸化在细胞周期调控中的作用研究 - 浙江大学学报.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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trfl 219位磷酸化在细胞周期调控中的作用研究 - 浙江大学学报

第36卷第4期浙江大学学报(医学版) Vol36NO4 OF 2007生 JOURNALZHEJIANGUNIVERSITY(MEDICAI，SCIENCES)2007 http：{fWWW．journals。ziu．edu．cn／med TRFl 219位磷酸化在细胞周期调控中的作用研究徐熠熠，蓝建平，朱园园，佘建，来晓喻，孙洁，黄河 (浙江大学医学院附属第一医院血液科，浙江杭州310003) [摘要] 目的：研究端粒结合因子一1(TRFl)丝氨酸219位磷酸化对细胞周期的影响。方法：突变 GFP，核苷酸测序和免疫印迹验证目的基因序列及蛋白表达。将野生型和突变体质粒用脂质体转染法转入HeLa细胞，观察它们在细胞中的定位、流式细胞仪检测各细胞周期的细胞数量、免疫印迹检测转染后ATM蛋白水平的改变。结栗：测序证实突变成功，GFP抗体免疫印迹证实了突变体的蛋白表达。荧光显微镜下观察到TRFl$219A 氨酸219位的磷酸化可以抑制由于TRFl过量表达而引起的细胞周期G2／M期的阻滞。 [关键词]端粒；端粒结合蛋白类；端粒结合因子1；ATM；磷酸化；细胞周期 394．3 [中图分类号]R [文献标识码]A roleofSer ofTRF1in ofcell 219 Important phosphorylationregulation cycle XU al(TheFirst of Yi—yi，LANJian—ping，ZHUYuan—yuan，et AffiliatedHospital，College 310003，China) Medicine，ZhejiangUniversity，Hangzhou theroleofSer219 of [Abstract]Objective：Toinvestigate phosphorylation factor1)in ofcell repeatbinding regulationcycle．Methods：Themimicking mutant(TRFl$219DGFP)andthenon—phosphorylatable mutant and werechecked and constructed；the correspondingproteins by genes sequencing Western was todetectthelocalization blot，respectively．Immunofluorescencestainingperformed ofmutantsinHeLacells．Cellwas flow andATMlevelwasevaluated cycleanalyzedby cytometry mutant wereverifieddirect and by genes by sequencingprotein immunobIotting．Results：The of mutantswa