抗生素对韭菜根尖培养植株再生的影响 - 核农学报.pdfVIP

( ) 核 农 学 报 　2003 ,17 2 :101～104 10 1 　 Acta Agriculturae N ucleatae Sinica ( ) 文章编号 2003 0210104 抗生素对韭菜根尖培养植株再生的影响 张 　松 　达克东 　曹辰兴 　曹淑荣 　姜璐琰 ( 山东农业大学园艺学院 , 山东 泰安 　271018) 摘 　要 : ( ) 卡那霉素 Km 和 G4 18 对韭菜根尖培养植株再生均有抑制作用 , 随浓度提高 愈伤组织和芽的分化频率逐渐降低 , G4 18 的抑制作用更加显著 , 当 Km 取 20mgL 、 ( ) ( ) G4 18 取 15mgL 时 ,不能诱导成芽 。羧苄青霉素 Crb 和噻孢霉素 Cef 对韭菜的植株 再生也有抑制作用 ,当 Crb ≥300mgL 、Cef ≥200mgL 时 ,严重影响愈伤组织和芽的分 化频率 ,出芽数也迅速减少 ,抑制作用随浓度提高而增强 。在所取浓度范围内 Timen tin 对植株再生的抑制作用较小 ,对愈伤组织和芽的分化频率影响不大 ,但是随着 Ti mentin 浓度提高 ,出芽数逐渐降低 , 当 Timentin = 500mgL 时 , 出芽数降低到对照的 494 % 。 关键词 :韭菜 ;根尖 ;组织培养 ;植株再生 ;抗生素 ( ) 韭菜 A llium tuberosum Rottle 是我国重要的蔬菜作物之一 ,种质资源丰富 ,栽培面积大 ,年 产量高 。但由于自然群体内缺乏有效的抗虫基因 ,韭菜的抗虫性较差 ,特别是韭蛆为害严重 。 韭蛆是地下害虫 ,防治比较困难 ,只能用农药灌根 ,常用剧毒农药 1609 、辛硫磷等 ,虽然在一定 程度上能够控制韭蛆为害 ,但是农药残留严重 ,甚至危及消费者健康 。将外源基因导入植物 , 使植物获得相应的抗病虫性 ,可以减少或不使用农药 。抗生素在基因转导过程中作为转化植 株的选择剂和杀菌剂使用 ,对各种植物的组织培养影响不一 。应当使用选择杀菌效果好同时 又对供试植物的植株再生影响较小的抗生素 。本研究在韭菜组织培养高频植株再生的基础 上 ,探讨了抗生素对培养物的影响 ,为基因转导研究打下基础 。 1 　材料与方法 以山东农业大学雄性不育系为母本配制的杂交种 918 为试材 。韭菜种子先用 70 %酒精 浸泡 5min ,转入 01 %升汞溶液中消毒 10min ,然后用无菌水冲洗 3 遍 ,置于 MS 基本培养基 (Murashige Skoog) [2 ] 上 。培养基含蔗糖 30gL 、琼脂 7gL ,p H 58 。种子萌发后 7d 取 05 ～ 1mm 的根尖为外植体 ,接种在 MS + NAA1mgL + BA2mgL + 抗生素的诱导培养基上 ,每个处理 接种 30～40 个根尖 ,2 次重复 。培养基除抗生素成分外均在 12 1 ℃高温灭菌 20min ,抗生素过 滤灭菌 ,待培养基温度降低到 40 ℃左右时加入 。所有材料先在 25 ±1 ℃的黑暗条件下培养至 出芽 ,再移入光照培养箱内,光照时间 16hd ,光照强度 3000lx 。培养 40d 后调查愈伤组织及芽 收稿 日期 ( ) 作者简介 :张松 1968～ ,女 , 山东蓬莱人 ,博士 , 山东农业大学副教授 ,主要从事园艺植物生物技术研究 102 核 　农 　学 　报 17 卷 的分化情况 。 2 　结果与分析 21 　Km 对韭菜根尖培养植株再生的影响 由图 1 可见 ,Km 对韭菜根尖培养有抑制作用 。随 Km 浓度提高 ,韭菜根尖培养愈伤组织 和芽的分化频率以及平均出芽数逐渐降低 ,Km 对芽