实验三 霉菌、放线菌和土壤中微生物分离纯化.pptVIP

实验三 放线菌、霉菌的形态观察及微生物的分离纯化 ;一、实验目的;二、实验原理 ; ⑴营养菌丝：又叫初级菌丝体或一级菌丝体，匍匐生长于培养基内，主要生理功能是吸收营养物，故亦称基内菌丝。营养菌丝一般无隔膜，直径0.2—0.8μ，但长度相差很大，短的小于100μ，长的可达600μ以上，有的无色素，有的产生黄、橙、红、紫、兰、绿、褐、黑等不同色素，若是水溶性的色素，还可透入培养基内，将培养基染上相应的颜色，如果是非水溶性（脂溶性）色素，则使菌落呈现相应的颜色，因此，色素是鉴定菌种的重要依据。 ⑵气生菌丝：又称二级菌丝体。营养菌丝体发育到一定时期，长出培养基外并伸向空间的菌丝为气生菌丝。 ⑶孢子丝：当气生菌丝体发育到一定程度，其上分化出可形成孢子的菌丝即孢子丝，又名产孢丝或繁殖丝。 放线菌最突出的特性之一是产生大量的、种类繁多的抗生素，根据估计，全世界共发现4000多种抗生素，其中绝大部分是由放线菌产生的。 ;厅墓阮奢弘害蕴疫痊葱幸泥捆球费衅捎凝应缚皱拧老呼嫡玲耿挡嘛阎圭骆实验三 霉菌、放线菌和土壤中微生物分离纯化实验三 霉菌、放线菌和土壤中微生物分离纯化;2、霉菌： 霉菌是一些“丝状真菌”的统称，不是分类学上的名词。凡是在基质上长成毛状、棉絮状或蜘蛛网状的丝状真菌统称霉菌。 霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。因此，在观察是要注意菌丝的直径大小，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子是哪一种，孢子是怎样着生的。 由于霉菌的菌丝较粗大，而且孢子容易飞散，如将菌体置于水中容易变形，故观察时状不用水浸法制片，而将菌体置于乳酸石炭酸棉兰染液中，使细胞不易干燥，并有杀菌作用。 ;嘴烂镇斡屿浓孜瑚香蛙箔钝靠摩皋炒红爸掺展霄纤搂跟气我邦蜀遂棕姐椒实验三 霉菌、放线菌和土壤中微生物分离纯化实验三 霉菌、放线菌和土壤中微生物分离纯化;煎噶技暮芬妒铸泳唉肆纵锤烦篮厌跋墒忘裸接梧辗约荚酿仪藕弟塞丢叶料实验三 霉菌、放线菌和土壤中微生??分离纯化实验三 霉菌、放线菌和土壤中微生物分离纯化;根霉;三、实验材料;四、实验步骤; 2、霉菌：在载玻片上滴加一滴乳 酸石炭酸棉兰→用解剖针取少许霉菌 于染色液中→挑开菌丝→盖上盖玻片 片→镜检。 ;观察黑曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认分生孢子梗、足细胞和分生孢子）：; 观察根霉菌丝情况和子囊孢子情况（着重辨认孢子囊、包囊梗、假根）：;五、实验结果;实验(二)、 从土壤中稀释分离微生物 一、实验目的： 学习微生物稀释平板计数及划线分离技术 二、实验原理: 采用适宜(选择)培养基和培养条件，或加入某种抑制剂有利于目标微生物的生长，从而分离获得目标微生物的纯培养：常用稀释平板分离法和划线分离法在固体培养基上形成单个菌落 依据一个单细胞在固体培养基上培养后可以长成一菌落从而推算样品中含有多少细菌或真菌的活菌数目; ;（二）悬液稀释：方法见下图：;（三）倒固体琼脂培养基平板： 分离细菌的同学取一瓶牛肉膏培养基（200ml／瓶） 熔化后加制霉菌素1ml后倒平板。 分离真菌的同学取一瓶马丁-孟加拉红培养基（200ml／瓶）熔化后冷至50℃后加链霉素2ml倒平板。;（四）悬液涂布(演示): 无菌操作(从稀至浓将菌液涂布均匀)采用10－2，10－3，10 －4稀释液涂布马丁－孟加拉红平板；采用10－3，10－4，10－5稀释液涂布牛肉膏蛋白胨平板,每人用剩下的1个平板做划线分离，从三角瓶中取土壤悬液作划线分离（演示） （五）培养： 每个同学把平板用报纸包好（每个平板方向一致），写上班级和姓名，皿底朝上，置于培养箱培养(温度?!) 。 （六）检查结果;平板涂布; 划线分离方式 ;结果分析: 1. 我所涂平板种类： （牛肉膏或马丁氏） 2. 计数：牛肉膏平板取单菌落数目在30～300个左右的稀释度来计数，马丁氏平板取单菌落数目在10～100个左右的稀释度来计数 3.我所计数的平板稀释度是： 单菌落数目： 、 、 。 4.计算：活菌数目/每克土壤＝ （计算过程）＝ 个/每克土壤 5. 对你和同伴的细菌及真菌计数结果进行分析;实验报告 从土壤中稀释分离微生物的原理、方法、步骤。 2．思考题 (1)为什么融化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板? (2)要使平板菌落计数准确，需要掌握哪几个关键?为什么? (3)试比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点及应用。 (4)当你的平板上长出的菌落不是均匀分散的而是集中在一起时，你认为问题出在哪里?