谷氨酸和味精.pptVIP

第五章 谷氨酸及味精;味精主要物理性质;主要化学性质;味精安全性;味精安全性;味精安全性使用;味精发酵生产工艺流程 ;一、合成谷氨酸的途径 二、葡萄糖发酵谷氨酸的理想途径 三、控制谷氨酸生产菌细胞膜渗透性的方法 四、谷氨酸生产菌的特征和种类 五、生产菌种的扩大培养;一、谷氨酸发酵的代谢途径;1、谷氨酸的生物合成包括 糖酵解作用（glycolysis, EMP途径） 戊糖磷酸途径（pentose phosphate pathway，HMP途径） 三羧酸循环（tricarboxylic acid cycle） 乙醛酸循环(glyoxylate cycle) 丙酮酸羧化支路（CO2固定反应）等;CO2固定酶系活力强;3、 代谢途径中谷氨酸合成的方式 （1）氨基转移作用 ;（2）还原氨基化作用 ;（3）其他生物合成方式 ;4、谷氨酸合成途径分析;;礼匿妻肩印既镁掳泽瓢诬西姓寻拒斌拭膳开滔力膏妒暗火俞征嘘池寓旬扛谷氨酸和味精谷氨酸和味精;4、谷氨酸生物合成过程中的途径（续）;（2）磷酸己糖途径;磷酸己糖途径;（3）三羧酸循环;（4）二氧化碳固定反应;（5）乙醛酸循环;乙醛酸循环的作用;（6）还原氨基化反应 ;由葡萄糖生物合成谷氨酸的理想途径：A？B？;;;;Glu产生菌主要生理生化特性 需氧，生物素缺陷型bio-,有乙醛酸循环，羧化酶活性强（bio作为辅酶） 柠檬酸、异柠檬酸、谷氨酸脱氢酶活性高，Glu合成中存在正常反馈阻遏和反馈抑制。菌体细胞膜通透性差，不利于Glu胞外分泌。 ; 生物素对CO2固定反应的影响 生物素是丙酮酸羧化酶的辅酶，参与CO2固定反应，据报道，生物素大过量时（100?g/L以上），CO2固定反应可提高30%。; 生物素对糖代谢速率的影响 生物素充足条件下，丙酮酸以后的氧化活性虽然也有提高，但由于糖降解速率显著提高，打破了糖降解速率与丙酮酸氧化速率之间的平衡，丙酮酸趋于生成乳酸的反应，因而会引起乳酸的溢出 生物素对乙醛酸循环的影响 乙醛酸循环的关键酶异柠檬酸裂解酶受葡萄糖、琥珀酸阻遏，为醋酸所诱导。在低浓度生物素条件下，因琥珀酸氧化能力降低而积累的琥珀酸就会反馈抑制该酶的活性，并阻遏该酶的合成，乙醛酸循环基本上是封闭的，代谢流向异柠檬酸→α-酮戊二酸→谷氨酸的方向???效率地移动。;生物素控制磷脂的合成 使用生物素缺陷型菌株进行谷氨酸发酵，通过限制发酵培养基中生物素的浓度控制脂肪酸生物合成，从而控制磷脂的合成 作用机制：生物素作为催化脂肪酸生物合成最初反应的关键酶乙酰CoA羧化酶的辅酶，参与了脂肪酸的合成，进而影响磷脂的合成。当磷脂合成减少到正常量的一半左右时，细胞变形，谷氨酸向膜外漏出，积累于发酵液中;控制生物素添加量使菌种生产Glu 高浓度bio增强羧化酶活性，促进羧化反应利于Glu合成。低浓度bio降低裂解酶活性，使菌体生长后关闭乙醛酸循环，使底物流向Glu合成，低浓度bio使膜磷脂合成缺陷，增加膜通透性，利于Glu胞外分泌，解除反馈调节，利于Glu合成并大量积累。 添加亚适量，5-10μg/L 培养基，生产Glu; 培养前期，bio充足，存在乙醛酸循环，中间物质和能量充足，长细胞，膜磷脂合成正常，正常反馈调节，不积累Glu，细胞形态正常。;四、谷氨酸生产菌的生化特征和种类 ;谷氨酸生产菌的生化特征;五、生产菌种的扩大培养;2、常用的生产菌株;3、 培养基的配制;②二级种子培养基;3 发酵培养基;三、 灭菌;四、 空气的净化;五 、种子扩大培养;五 、种子扩大培养;2、二级种子培养 二级种子是在种子罐里培养的， 培养二级种子时的接种量为0.2%～0.5％，温度为32～34℃，培养时间为6～8h。 注意事项： 种子培养基的N源、生物素和P盐适当高，但G 2.5%左右。 温度不要波动太大；适当通风搅拌；注意种子培养时间。;第二节 原料糖化及发酵培养基配制 ;目的： 降低生物素的含量。 方法： 活性炭吸附法：用量为糖蜜的30%—40% 水解活性碳处理法：盐酸+活性碳 树脂处理法： ;(1)糖蜜中糖浓度高，必须进行稀释，一般稀释至18～20%。 (2)糖蜜中杂质很多，如黑色素、灰分等，必须进行澄清、过滤。一般采用加酸静置，加酸调pH 3.0～3.8，并定时通风，除溶液中的SO2、NO2等有害性挥发成分。 (3)糖蜜中的含氮物质较少，应补充营养盐，如硫酸氨，磷酸钙等物质。 (4)调pH 7.0～7.5。 (5)灭菌：80～90℃。;二、淀粉质原料;① 淀粉的酸解反应 淀粉的酸解 葡萄糖的复合反应 影响因素 葡萄糖的分解反应 5-羟甲基糠醛 ;② 淀粉酸解法工艺要点 糖化条件的控制 淀粉乳浓度：10-