液质谱联用法同时检测体外生殖培养液中的3种能量成分.docVIP

液质谱联用法同时检测体外生殖培养液中的3种能量成分 黄元礼，柯林楠，王春仁，杨昭鹏(中国食品药品检定研究院医疗器械所，北京市 100050) 引用本文：黄元礼，柯林楠，王春仁，杨昭鹏. 液质谱联用法同时检测体外生殖培养液中的3种能量成分[J].中国组织工程研究，2017，21():291-295. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.02.023 ORCID: 0000-0001-8992-3909(黄元礼) 文章快速阅读： 文题释义： 人类辅助生殖技术：指采用医疗辅助手段使不育夫妇妊娠的技术，包括人工授精和体外受精-胚胎移植及其衍生技术两大类。 体外生殖培养液：是含有能量成分、渗透压调节成分、酸碱度调节成分、氨基酸、生长因子等，保证生殖细胞在体外可以存活并成长的一种培养液。不同的体外生殖细胞使用不同的培养液，在不同的生长阶段，也会使用不同的培养液，因此体外生殖培养液的成分对最终体外生殖手术的成功率有很大影响。 摘要 背景：目前，对于体外生殖培养液的质量控制文件或技术标准中，对成分含量的指标及检测方法未做明确规定，为保证该类产品的安全有效性，应及早建立质量标准。 目的：建立采用液相质谱联用法检测体外生殖培养液中葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠3种指标成分的方法，分析不同用途培养液中3种成分的含量。 方法：采用超高效液相色谱三重四级杆质谱联用法，使用SUPELCO Discovery HS F5-3色谱柱(15 cm×2.1 mm，3 μm)，流动相为0.1%甲酸水溶液0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱，流速0.35 mL?min1，柱温40 ℃；质谱采用电喷雾离子源，负离子模式扫面，扫描方式为多反应监测。 结果与讨论：葡萄糖、丙酮酸钠、乳酸钠分别在0.110 mg/L(r=0.999 8)、0.055 mg/L(r=0.999 4)、0.110 mg/L(r=0.999 4)范围线性关系练好；平均加样回收率在96.4%98.1%之间，相对标准偏差均小于2.8%。说明采用液相质谱联用法检测体外生殖培养液灵敏、快速、准确、专属性强，可为体外生殖培养液的质量标准研究提供依据。 关键词： ；超高效液相；三重四级杆质谱仪；体外生殖培养液；葡萄糖；乳酸钠；丙酮酸钠；含量；Simultaneous determination of three main bioactive constituents in the in vitro fertilization medium by UHPLC-MSMS Huang Yuan-li, Ke Lin-nan, Wang Chun-ren, Yang Zhao-peng (Institute of Medical Equipment, National Institute for Food and Drug Control, Beijing 100050, China) Abstract BACKGROUND: In the present quality control file or technique standards of in vitro fertilization medium, the indicators of the component contents and detection methods have not been clearly defined. To ensure the safety and effectiveness of these products, we should establish the quality standards as early as possible. OBJECTIVE: To establish a method for determining the three main bioactive constituents of in vitro fertilization medium including glucose, lactic acid sodium salt, pyruvic acid sodium salt by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometric method (UHPLC-MSMS), and to analyze the content of each constituent. METHODS: The UHPLC-MSMS was used, and UHPLC separation was performed on a SUPELCO Discovery HS