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- 2017-07-30 发布于北京
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《黑龙江畜牧兽医)2oo8年第3期 3l
3 讨论 冻保存过程中要严格掌握降温速度,过慢会促进冰晶
3.1 冻存液与冻存保护剂 形成,过快会影响细胞内水分透出。本试验选择的分
冷冻保存培养细胞时必须加入保护剂,否则细胞 段降温,细胞冻存与复苏采用慢冻速融的方法。本试
内外的水分会很快形成冰晶,细胞内冰晶的形成使细 验中,先将细胞置于一80℃超低温冰箱过夜,再放人
胞内部空间结构配布紊乱,蛋白质变性,溶酶体膜损 液氮罐,在不影响冻存细胞存活率的前提下避免了繁
伤,酶被释放,破坏细胞内结构成分,细胞膜通透性增 琐的程序降温。具体操作时,将冻存管用棉花包裹,
强,细胞内容物丧失,细胞核内DNA也发生了不可逆 以起到保温的效果。细胞冻存时,一般要求密度1
的损伤,使细胞死亡。常用的冷冻剂为甘油和DM. ×10 j/mL,因为高密度对细胞自身有利。
SO,这两种物质对细胞均无明
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