CoCl2所致化学缺氧促进脂肪组织缺血缺氧耐受相关基因表达探究.doc

CoCl2所致化学缺氧促进脂肪组织缺血缺氧耐受相关基因表达探究【摘要】 目的 探讨脂肪组织中是否存在缺氧预适应现象，构建CoCl2致缺氧的缺氧模型。方法 不同浓度的CoCl2大鼠腹股沟区皮下层浸润注射，分别用免疫组织化学法和RT-PCR法检测该区脂肪HIF-1α蛋白和HIF-1α mRNA的表达情况。结果 用不同浓度的CoCl2行化学缺氧后在不同时间点观察有不同程度的HIF-1α蛋白和HIF-1α mRNA表达，其中，在浓度为20～40 mg/kg，时间为3 h时脂肪组织中HIF-1α表达达高峰。结论 脂肪组织存在缺氧预适应现象；CoCl2的浓度选择20～40 mg/kg，时间选择3 h时缺氧预适应效果较佳。 【关键词】脂肪移植；缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)；二氯化钴(CoCl2)；缺氧预适应 Study on the express of HIF-1α protein and HIF-1α mRNA afterin jected CoCl2 LIANG Jie, PENG Jun-qiang, PENG Zhi,et al.Department of plastic Beauty, Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, China 【Abstract】 Objective To investigate whether hypoxia preconditioning exist in adipose tissue,and construct the hypoxemic model of adipose tissue.Methods After injected different density CoCl2 to rats subcutaneously of groin,use immunohistochemical method detect HIF-1α protein，and use RT-PCR detect HIF-1α mRNA.Results After injected different density CoCl2,the adipose tissue of rats groin express different degree of HIF-1αprotein and HIF-1αmRNA.,and reach the peak when the density is 20-40 mg/kg and the time is 3 h.Conclusion Hypoxia preconditioning exist in adipose tissue,and the effect of preconditioning is most evidence when the density is 20-40 mg/kg and the time is 3 h. 【Key words】Fat transplantation；Hypoxia-inducible factor 1 α(HIF-1α)；CoCl2；Ischemic preconditioning (IP) 自体脂肪组织作为理想的软组织填充材料，具有生物相容性好，且没有免疫排斥反应，来源丰富等优点。但研究发现移植的脂肪颗粒，在体积和质量上减少30%~60%，甚至更多，且坏死的脂肪颗粒会引起纤维囊性化和假性囊肿[1]。目前提高脂肪组织游离移植成活率的研究主要集中于促进移植体血管生成，但不能在脂肪移植体血供恢复之前减少脂肪组织的坏死和纤维囊性化。80年代组织学的研究表明，在脂肪游离移植后10~20 d才有真正意义上的血管生成，此10~20 d为移植脂肪存活的窗口期[1,2]。提高脂肪组织在窗口期对缺血缺氧的耐受力是移植脂肪存活的关键。研究表明缺氧预适应可以提高多种组织对缺血缺氧的耐受力。 1 材料和方法 1．1 动物及分组 清洁级雌性SD大鼠72只，月龄2个月，体质量(20±20)g(由广东医学院实验动物中心提供)；按随机数字表法分成9组； 按量效关系分5组，分别对应0 mg/kg组、 5 mg/kg组、 10 mg/kg组、20 mg/kg组、40 mg/kg组；按时效关系分5组，分别对应 1 h组、3 h组、6 h组、12 h组、24 h组。其中量效关系20 mg/kg组与时效关系6 h组重合。 1．2 缺氧模型的构建 碘伏消毒后沿右侧腹股沟从内下到外上在皮下层作均匀的局部浸润注射CoCl2，注射后行轻柔按摩。按设计在注射后一定的时间切取右侧腹股沟区脂肪，取下脂肪约3～4 ml。 1．3 指标检测