小鼠睾丸组织中转录因子Elk1 cDNA克隆.docVIP

小鼠睾丸组织中转录因子Elk1 cDNA克隆【摘要】 为了确定Ets家族转录因子Elk1在睾丸组织中有无表达，提取了正常小鼠睾丸组织的总RNA，经RT-PCR、序列测定证实Elk1在正常小鼠睾丸组织中有表达，为进一步探讨其与睾丸发育及精子发生的关系奠定了基础。 【关键词】 Elk1转录因子；睾丸；小鼠 精原干细胞(spermatogonial stem cells, SSCs)微环境的转录调控需Ets相关分子(Ets related molecule, ERM)参与［1, 2］。ERM是Ets转录因子家族的成员之一，该家族至少包括11个亚家族、26个因子，广泛参与多种细胞的发育、分化、生长、转化等过程［3］。目前还不知道该家族其他分子在睾丸组织中是否表达。本研究旨在通过RT-PCR获得该家族转录因子Elk1基因的部分编码区，并对其序列进行分析，以确定其在正常睾丸组织中有无表达，为进一步探讨其与睾丸发育及精子发生的关系奠定基础。 1 材料与方法 1.1 实验动物及主要试剂、材料 7~8 周龄、体重30~35 g的成年雄性昆明白小鼠4只，颈椎脱臼法处死后取睾丸放入液氮，后移入-70°C冰箱保存。大肠杆菌DH5α株为本室保存，克隆载体pMD18-T、Ex Taq DNA 聚合酶、dNTP、反转录酶、RNase、Olig-dT、RNase抑制剂均购自于Taka