分子标记在花卉研究中的应用进展.pdfVIP

i麴垡壅些型蕉≥!!QZ生苤!!塑 旦茎煎堕 分子标记在花卉研究中的应用进展 丁岩樊守金 (th东师范大学，山东济南250014) 擅耍DNA分子标记是蛙形态标记、如胞荦拇记、生化标记之后生晨起耒的一种新的妻为理想的遗传标记。它促进了植轴遗传育种的 研克．在花卉研完中也得到了广i乏的应用。奴述分子标记的主喜囊型、原理和特点．以置它在花卉的素缘关系分析、品种鉴定和分类、遗传 多样性、遗传图谱的构建和辅助育种等方面的研究应用概况。 美t词分干棒记；花卉；应用 分子标记是一种新型的遗传标记．它不受环境条件和 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测多态性。AFLP标记的优点是稳定 发育时期等因素的影响。可代表物种本身遗传特性，已经成 性强、重复性好、多态性高，具有显性或共显性；其缺点是步 为研究植物遗传育种的有力工具。近年来，国内外许多学者 骤繁琐，对模板反应迟钝。成本高。 利用分子标记技术对花卉植物开展了不少研究。 1．4 I瞄R标记 1分子标记的分类 ISSP,标记根据基因组内广泛存在的微卫星基因序设 分子标记(Molecularmarker)是指与特定基因或标记连计单一引物．对基因组DNA进行扩增。扩增的指纹图同时 锁的一爱经过扩增并可检测出的DNA序列。DNA分子标提供基因组内多个位点序列信息。[SSR通常为显性标记． 记大多以电泳谱带的形式表现，大致可分为两大类。第一类 是以分子杂交为核心的DNA分子标记，主要包括限制性片 物不需预先的DNA测序．减少了预备工作，但有些ISSR引 段长度多态性标记(RFLP)：第二类是以聚台酶链式反应物可能在某些基因组DNA中因没有配对区域而无扩增产 (PCP,)为核心的DNA分子标记．包括随机扩增多态性DNA 标记(RAID)、简单序列重复标记(SSP-)、重复序列之间长度上占忧势；与RAPE)相比，ISSR揭示的多态性较高，精确度 与RFLP相当。 多态性(ISSR)、扩展片段长度多态性标记(AFLP)等。 1．1 R几P标记 1．5璐R标记 RFLP是利用限制性内切酶切割生物体基因组DNA在真核生物基因组DNA中广泛存在1,．06个核苷酸组 而产生的长短、种类、数目不同的限制性片段的技术，这些 成的短的、串联的简单重复序列(SSR)．又称为微卫星．SSR 具有差异性的DNA片段通过已克隆和标记的DNA片段两端有一段相对保守的单拷贝DNA序列．根据这段序列 设计出特异双引物。对重复区域进行PCR扩增。再经聚丙 作为探针进行Southern杂交。然后再放射自显影或非同位 烯酰胺凝胶电泳检测扩增片段的多态性即为SSR标记。由 素来检测DNA的多态性。RFLP具有技术稳定、重复性好、 无表性效应、等位基因之间共显性、非等位基因之间不存在 于SSR标记的多态性仅由简单序列重复次数的差异引起 上位效应、标记数量多等优点，是最有效的共显性DNA分 的．通常表现为共显性，可鉴别纯合子和杂合子。它的缺点 子标记；但RFLP分析的探针制备、酶切、转膜、分子杂交、是耍克隆足够数量的SSR需要足够的人力、物力和时间， 放射自显影等过程需花相当的经费和时间。并且不同物种 还要针对每类SSR的两端序列设计特异引物，工作量很 需制备不同的探针。 大。 1．2 RA肋标记 2 DNA分子标记在花卉研究中的应用殛进展 2’1种质资源鉴定 RAPD标记是用～系列的单链随机引物(通常为10碱 长期以来．各种花卉异地相互引种栽培，杂交及突变，