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浅部真菌病及病原学研究【摘要】 目的 了解近年来本地区浅部真菌病病种及真菌菌种的种类和构成情况,为防治浅部真菌病提供理论依据。方法 对1578例临床拟诊为浅部真菌病者进行真菌直接镜检及培养。结果 本地区浅部真菌病除头癣外城市患者均高于农村患者,城乡之比为2.08:1;浅部真菌病发病率最高的为手足癣482例(58.6%),其次是股癣110例(13.4%);浅部真菌病菌种的分布以红色毛癣菌为主135株(41.4%),其次是须癣毛癣菌63株(19.3%)。结论 皮肤癣菌是造成浅部真菌感染的主要原因,加强镜检与培养,采取相应防治措施,降低浅部真菌感染的发生。 【关键词】浅部真菌病;病原菌;癣 浅部真菌病是指真菌在头皮发根、黏膜、手足部、指趾甲、腹股沟及机体其他部位表皮生长、繁殖引起的感染[1]。为了解近年来本地区浅部真菌病的患病情况,本文对我院皮肤科门诊拟诊为浅部真菌病的患者1578例,进行了真菌常规镜检和分离培养,现将结果报道如下。 1 资料与方法 1.1 研究对象 2008年1月至2009年12月在本院皮肤科拟诊为浅部真菌病的患者1578例,男713例,女865例,年龄5~85岁。 1.2 标本采集 浅部真菌病的标本以毛发、皮屑、甲屑、水疱疱壁、脓液为多。皮屑取新鲜皮损的活动性边缘;水疱取疱壁和基底部皮损;脓疱取脓汁;间擦性皮损去除浸渍表皮,刮取基底部损害;毛发标本取5~6根松动而脆的病发连根拔除;采集甲标本时刮取靠近病甲床的碎屑。采集标本时注意无菌操作。皮肤和皮肤附属器的标本,75%酒精消毒后以钝刃的手术刀刮取;毛发用镊子拔除;甲标本除刮除外,也采用剪刀剪取或采用口腔科牙钻钻取深部甲屑。对于面部、皮肤薄嫩处及儿童患者的直接镜检标本,采用透明胶带法采集,即以透明胶带粘贴在损害局部1 min后揭下镜检。 1.3 直接镜检 将标本置载玻片上,加1滴10%KOH封固液,加盖玻片,快速通过酒精灯火焰几次以促进角质溶解,注意避免过度加热而使封固液沸腾,轻压盖玻片驱除气泡,吸除盖玻片周围溢液,即置光学显微镜下观察。先用低倍镜查找菌体,然后换高倍镜观察菌体结构。以查到菌丝或孢子为阳性结果,阴性结果连查三次才确定。 1.4 真菌培养方法 选取适检的样本接种于含氯霉素的沙堡氏培养基的斜面上,25℃~28℃ 恒温培养4周,无真菌生长视为阴性;培养阳性者,用马铃薯琼脂培养基、尿素琼脂培养基、玉米琼脂培养基进一步分离培养,通过观察菌落的形态、大小、生长速度、色素及镜下结构等进行菌种鉴定,必要时做玻片小培养、37℃培养和生理生化反应,鉴定到种的水平。 2 结果 2.1 镜检及培养 临床拟诊为浅部真菌病的1578份患者标本,直接涂片查见菌丝和/或孢子的823份,阳性率52.2%;从1527份标本中培养出真菌326株,阳性率21.3%。 2.2 病种及城乡分布 823例镜检阳性患者中,城市患者556例、农村患者267例,城乡之比2.08:1。手足癣482例(58.6%),其中农村患者112例、城市患者370例;股癣110例(13.4%),农村39例、城市71例;甲真菌病107例(13%),农村45例、城市62例;头癣70例(其中脓癣7例,占8.5%),农村51例,城市19例;体癣35例(4.3%),农村l3例、城市22例;花斑癣及糠秕马拉色菌毛囊炎19例(2.3%),农村7例,城市12例。 2.3 浅部真菌病病原菌分布 浅部真菌病原菌的分布以红色毛癣菌为主135株(41.4%),其次是须癣毛癣菌63株(19.3%)。在浅部真菌病种中,以手足癣分离出的真菌最多170株(52.1%),其次是甲真菌57株(17.5%),见表1。 表1 浅部真菌病原菌分布 菌种手足癣甲真菌体癣股癣头癣脓癣合计 红色毛癣菌87(51.2)25(43.9)6(37.5)15(37.5)02(40.0)135(41.4) 须癣毛癣菌36(21.2)12(21.1)6(37.5)9(22.5)0063(19.3) 犬小孢子菌14(8.2)02(12.5)7(17.5)18(47.4)3(60.0)44(13.5) 念珠菌18(10.6)17(29.8)04(10.0)3(7.9)042(12.9) 絮状表皮癣菌10(5.9)3(5.3)05(12.5)3(7.9)021(6.4) 铁锈色小孢子菌5(2.9)02(12.5)011(28.9)018(5.5) 断发毛癣菌00003(7.9)03(0.9) 合计170(52.1)57(17.5)16(4.9)40(12.3)38(11.7)5(1.5)326(100.0) 作者单位:413000湖南省益阳市中心