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艾篙挥发油体内外抑菌作用实验探究【摘要】目的:对艾篙挥发油进行体外抑菌作用和体内保护作用进行的实验研究,检测艾篙挥发油体内外抑菌效果。方法:并以红霉素为对照采用琼脂培养基(Mue-H inton)二倍稀释法对艾篙挥发油的最低抑菌浓度(MIC)检测;通过对感染小鼠进行试验性治疗来检测致死保护率。结果:艾篙挥发油对实验菌的MIC90值范围0.78-25μL/mL;对对金葡萄球菌感染小鼠致死保护率20%-50%,对绿脓杆菌感染小鼠死亡的保护率30%-40%,对大肠杆菌感染小鼠死亡的保护率20%-40%。结论:艾篙挥发油体外对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌具有抑菌作用,其抑菌作用优于或等同于红霉素;体内对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌感染 小鼠具有较好的保护作用。 【关键词】艾篙挥发油;最低抑菌浓度;体外抑菌;体内保护 【中图分类号】R-3【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)10-042-2 菊科多年生植物艾篙Artemisiaar gyile vel.et Vant.的干燥叶作为中草药,可以就地取材,有较高的药用价值和悠久的应用历史。传统药性理论认为艾篙具有理气血、逐寒湿、温经血、安胎、杀虫止痒等作用。现代医学的药理研究表明,艾篙挥发油是一种广谱的抗菌抗病毒药物,它对细菌和病毒具有抑制和杀伤作用,对呼吸系统疾病有一定的防治作用。艾篙味芳香、苦燥辛散,能理气血、温经脉、逐寒湿、止冷痛,为妇科良药。可用于治疗院腹冷痛,经寒不调,宫冷不孕等症;炒炭止血,可用于治疗虚寒性月经过多,崩漏带下,妊娠胎漏;艾篙捣绒,制成艾条、艾柱,外灸能散寒止痛,温煦气血;煎汤外洗可治湿疮疥癣,祛湿止痒。艾篙化学成分含挥发油0.45%-1.00%,是艾篙抗菌作用的重要成分。油中主要为:一松油醇、8-按叶精、α一侧柏酮(α- thujone)、α一水芹烯(α-pHellandrene),β-T香烯(β-caryopHyllene),茨烯、樟脑、藏茵香酮、反式苇醇(transcarveol)。为了将艾篙更方便、科学地应用于临床,我们提取艾篙挥发油,进行了体外抑菌作用和体内保护作用的研究。 1实验材料 1.1药物 艾篙购于安徽中医学院第一附属医院药房;红霉素片,石药集团欧意药业有限公司出品,批 1.2菌种 金黄色葡萄球菌10株(含标准菌株ATCC25923)、大肠杆菌10株(含标准菌株ATCC25922)、绿脓杆菌10株,由本院微生物教研室提供。 1.3培养基 琼脂培养基(Mue-H inton),上海东海医化试剂公司生产,批号0010320。 1.4动物 昆明种小鼠,体重(20士2)g,清洁级,安徽医科大学动物中心提供。 1.5艾篙挥发油制备 取艾篙适量,装入5000mL的蒸溜瓶中,加水浸泡1h ,加水量不得超过3500mL。按《中国药典》2000版(一部)附录XD水蒸气蒸馏法提取挥发油。馏出物含有少量水。加氯化钠少许,置冰箱冷藏24h,使水、油两相分层,再用分液滤斗进行分离,滤得绿色透明的、具有浓郁芳香气味的液体,即艾篙挥发油。 2方法与结果 2.1体外抑菌作用 2.1.1供试菌液的制备将各供试菌种分别接种于供试培养基中,37℃培养24h,选用标准菌落接种于液体培养基中培养6h,调整菌液浓度为108CFU/mL,备用。 2.1.2含药物培养基的制备将试验品及对照品分别加入培养基中做2倍稀释,艾篙挥发油(μL/ml)和红霉素(μg/mL)最终浓度依次为200,100,50,25,12.5, 6.25,3.12,1.56,0.78,同时设空白对照。 2.1.3供试菌接种用接种环分别取供试菌液一环(含菌量约为104 CFU),分别接种于含艾篙挥发油的培养基上和含红霉素的培养基上,37℃培养24h,观察试验结果。艾篙挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌有显著的抑菌作用;其抑制金黄色葡萄球菌的效果等同于红霉素,抑制大肠杆菌、绿脓杆菌的效果大大优于红霉素。结果见表1。 表1 艾篙挥发油和红霉素对实验菌MIC测定结果物(N=10) 实验组 MIC 红霉素(μg/mL) 艾篙挥发油(μL/mL) 大肠杆菌 MIC50 12.50 0.78 MIC90 200 0.78 金黄色葡萄球菌 MIC50 0.78 0.78 MIC90 0.78 0.78 绿脓球菌 MIC50 100 0.312 MIC90 100 25 注:MIC50,MIC90分别为抑制50%,90%所试菌株的MIC值 2.2体内保护试验 2.2.1菌液及药液稀释将3种菌的原菌液用5%