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荧光偏振免疫法测定丙戊酸钠血清药物浓度
荧光偏振免疫法测定丙戊酸钠血清药物浓度【摘要】 目的 检测丙戊酸钠血药浓度。方法 采用荧光偏振免疫(TDx)法。结果 测定目标血清血药浓度在有效范围内的占受试58.7%。结论 本方法简便、快速,适用于临床常规检查。
【关键词】荧光偏振免疫(TDx)法;丙戊酸钠;血药浓度
Determination of concentration of sodium valproate(VPA)in Human blood serum by TDx
SUN Li-wei,YAN Hong-yue.XinXiang Central Hospital,HeNan 453000,China
【Abstract】 Objective To determine the concentration of of sodium valproate(VPA)in human blood serum.Methods Determined by TDx.Results The concentration of sodium valproate(VPA)was 58.7%in 50~100 μg/ml.Conclusion The method is accurate and rapid and suitable.
【Key words】TDx;sodium valproate(VPA);Concentration of blood serum
丙戊酸钠对人的各型癫痫均有效。因个体差异大,荧光偏振免疫(TDx)法对临床使用丙戊酸钠患者血药浓度进行测定,以便指导合理用药。
1 仪器与试剂
TdxFlx荧光偏振免疫分析仪(美国雅培公司);Anke KA-1000离心机(上海安亭科学仪器厂);丙戊酸钠试剂盒(美国雅培公司2010-04-08,65525Q100);丙戊酸钠定标液(美国雅培公司2009-08-08,57126Q100)。
2 方法与结果
2.1 样品预处理 患者血样于离心机离心10 min,转速3000转/min,吸取上层血清100 μl加入样品孔中,锁紧转盘,放入仪器中,将冰箱中丙戊酸钠试剂盒按顺序将盖子放入对应的盖槽内,关紧机门,按RUN键开始自动检测。
2.2 定标 丙戊酸钠定标样品处理操作步骤同2.1。结果见表1。
表1
标准曲线(STANDARD CAL 6点定标)
IDCONC(μg/ml)AVGPFITPPERR
A0.00279.63279.630.00
B12.50236.90234.522.38
C25.00202.52205.43-2.91
D50.00170.52170.410.11
E100.00139.72136.912.81
F150.00118.69120.73-2.04
注:RMSE=1.81
2.3 回收率 将浓度为100 μg/ml 的丙戊酸钠标准液200 μl加入到1 ml的人全血中,然后按照2.1项下方法测定回收率,测得回收率97.5%。
2.4 精密度 用已知浓度的血清样本,连续测定6次,计算得RSD=1.9%。
2.5 测定结果 本文所测定为2010年第二季度共67个受试对象,均服用丙戊酸钠片,50~100μg/ml范围内占58,7%,有41.3%的患者达不到或超出安全治疗范围。
3 讨论
丙戊酸钠有使用气相色谱法及高效液相色谱法对其测定[1,2],检测条件要求较高,耗时长。再者通过监测分析,临床医生很难根据经验达到较大程度的满意的临床治疗效果,荧光偏振免疫(TDx)法简便、快速,适用于临床常规检查。
参考文献
[1] Nishioka R,Takeuchi M,Kawai S.Improved direct injection method and extractive methylation method for determination of valpraic acid in serum by gas chromatography.J Chromatog r,1985,342:89.
[2] Bousquet E,Tirendi S,Santagati NA.Clean up and determination of sodium valproate in serum by high performance liquid chromatography with fluorimetric detection.Pharmazie,1991,46 H 4:257.
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