葛粉中葛根素高效液相色谱研究.docVIP

葛粉中葛根素高效液相色谱研究提要：目的：测定葛粉中葛根素的含量。方法：用HPLC法测定，以MeOH－H2O－HAc（30：70：0.5）为流动相，250nm为检测波长。结果：葛根素呈良好的线性关系，平均回收率为98.6%, RSD为1.76%。结论：该法简单、快速、准确。 关键词：葛粉;葛根素;HPLC Study 0fPueraria in Pueraria Powder by Reversed-phase High Performance Liquid Chromatography LI Hong-yu,DAI Shi-wen, SHOU Dian ,ZHANG Jian-min,YU Zhong-ming (Zhejiang Academy of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou 310017,China) Abstract:Object:Determination of Pueraria in Pueraria Powder Methods: Puerariawere determined by HPLC.The mobile phase was MeOH－H2O－HAc（30：70：0.5）.Detection wavelength was at 250nm.Results: Pueraria showed a good linear relationship.The average recovery was 98.6% and RSD was 1.76%.Conclusion:This method was simple,quick and accurate. Key words: Pueraria Powder ; Pueraria ;HPLC 葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata (Willd.) Ohwi的干燥根,是常用中药材,具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻功效，用于外感发热头痛、项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，高血压颈项强痛等[1]。现代研究证实，葛根中的主要有效成分为葛根素等异黄酮类化合物，具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用，同时也有降低血压的作用。有关葛根中葛根素等异黄酮的含量测定研究已有不少报道[2-5]，但对葛粉中葛根素含量测定报道不多。本文对葛粉中葛根素的提取条件和测试条件等进行比较研究,并采用高效液相色谱法对葛粉样品进行了定量分析, 结果令人满意。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 岛津LC－10Atvp高效液相色谱仪；SPD－10 Avp紫外检测器；岛津UV－265紫外分光光度仪，多功能榨汁机/搅拌机SG300－I（上海科骏电器有限公司）。甲醇（色谱纯），水（二次蒸馏），其余均为分析纯。葛根素对照品（中国药品生物制品检定所）；鲜葛（浙江省永嘉县潘坑乡）。 1.2 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱C18 diamonsil5ul(150×4.6mm I.D)，MeOH－H2O－HAc（30：70：0.5）为流动相，紫外检测波长250nm。 2 结果与讨论 2.1 提取溶剂浓度的选择 精密称取同一样品约0.1g,分别加30%乙醇、50%乙醇和80%乙醇10ml，超声提取60分钟，进样5ul,比较峰面积，实验结果表明30%乙醇提取最好。 2.2 超声提取时间的选择 精密称取同一样品约0.1g,分别加30%乙醇10ml，超声提取30分钟、45分钟、60分钟，进样5ul,比较峰面积，实验结果表明超声60分钟为最佳提取条件。 2.3 流动相及流速的选择 试验时曾采用下述流动相进行测定：甲醇－水（25：75）、甲醇－水－醋酸（30：70：0.5）、甲醇－水（30：70）为流动相，结果采用甲醇－水－冰醋酸（30：70：0.5）为流动相，样品分离好。而流速也以1.0ml/min为合适。 2.4 标样溶液的制备 称取一定量葛根素对照品,用30%乙醇溶解配制成浓度为13ug/ml的葛根素标准液。 2.5 葛粉制备 取鲜葛用水洗净切片,称取20g放入搅拌机内，搅拌三次，每次1分钟，每次加水200ml， 150ml，100ml，合并浆汁放置二天，去掉上面的水，下面的粉浆用定量滤纸过滤，低温干燥，放入干燥器中备用。 2.6 供试品溶液制备 精确称取一定量葛粉于10mL容量瓶中,加30%乙醇10ml,超声提取1h,滤纸过滤,滤液过0.45um滤膜作为供试品溶液。 2.7 线性关系考察 在上述色谱条件下，分别进标样溶液0.5、3、5、7、10μl，测得各峰