血红素氧合酶-1-一氧化碳系统在肺纤维化大鼠中表达及药物干预.docVIP

血红素氧合酶-1/一氧化碳系统在肺纤维化大鼠中表达及药物干预【摘要】 目的 研究血红素氧合酶．1（HO．1）/一氧化碳（CO）系统在肺纤维化大鼠中的表达及药物干预影响，为肺纤维化的诊治提供一种新方法。方法 应用健康Wistar大鼠60只,随机分为4组，分别为对照组、肺纤维化组(纤维化组)、肺纤维化加HO．1特异激动剂组(加强组)、肺维化加HO．1特异抑制剂组(抑制组)。检测各个模型组中大鼠肺组织与血清中HO．1/CO体系表达情况，分析HO．1/CO体系在大鼠肺纤维化中的作用，以及药物对肺纤维化程度的影响。结果 在对照组中，HO．1与COHb在大鼠肺组织和血清中低表达，且两者差异无统计学意义(P0．05)，在单纯组、加强组、抑制组中，与对照组相比，HO．1与COHb在大鼠肺组织和血清中均高表达，以加强组为重，抑制组最低，两者差异具有统计学意义(P0．05).In idiopathic pulmonary fibrosis group，group of specific stimulator and the group of specific inhibitor，HO．1 expression and COHb expression in blood and lung tissues was higher than the goup of control， and there was significant association between HO．1 expression and COHb expression(P0．05).Conclusion The system of HO．1/CO participate in the process of idiopathic pulmonary fibrosis in rats.The extent ofidiopathic pulmonary fibrosis can be changed by intervention of medicion of heme oxygenase．1/CO.Therefore，it maybe a new method of pulmonary fibrosis diagnosis and therapy. 【Key words】 Idiopathic pulmonary fibrosis；Bleomycin；Hemin； SnPP； HO．1；CO 肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是由于过多的成纤维细胞聚集和细胞外的基质成分沉积而导致正常的肺组织结构改变和功能丧失的一类疾病。血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)是哺乳动物组织细胞微粒体的一种蛋白酶,催化血红素产生胆绿素、一氧化碳(CO)和亚铁，研究[1]提示气道平滑肌中存在HO．1和HO．2,HO．1主要是被一些因素诱导产生,包括缺氧、应激等。Prabhakar[2]等的研究表明，通常HO．1的表达很低甚至缺乏,但在应激和缺氧情况下明显提高，肺纤维化可使机体处于缺氧状态，故推测可使HO．1的表达增加，体内COHb生成增多，利用大鼠肺纤维化模型和应用HO．1的特异性激动剂和抑制剂，研究HO．1/CO在肺纤维化大鼠中的表达及药物干预的影响，为临床肺纤维化治疗提供一种新方法。 1 材料与方法 1．1 材料 应用佳木斯大学动物实验中心提供健康Wistar大鼠(黑动60只,雌雄各半,体质量170~200 g,正铁血红素购自美国Sigma公司，锡原卟啉(SnPP)购自美国Sigma公司，博莱霉素(BLM．A5)购自黑龙江省哈尔滨博莱制药有限公司，UV．756MC型紫外可见分光光度计购自上海精密化学有限公司。 1．2 方法 1．2．1 模型制备 参考文献方法略做改进[3．4]，将大鼠麻醉，气管内注射博来霉素(BLM．A 5．5 mg/kg)0．2~0．3 ml，建立肺纤维化组模型，气管内注射等量的生理盐水建立对照组模型，在肺纤维化模型组基础上分别腹腔注射血晶素或锡原卟啉(125 μmol/kg)注射液0．5 ml/d，建立加强组与抑制组模型。 1．2．2 评价 病理学检查:在大鼠肺纤维化造模后第7、14、28 d,在每个实验组随机处死5只动物,分离肺脏,注入10%(体积分数)福尔马林液1．5 ml保持30 min后,投入Bouins液固定24 h,常规脱水,石蜡包埋后,切片(3 μm)，行苏木精．伊红(HE)和Mallorys三色染色。光镜下观察有无炎性反应及纤维化发生。评价是采取Szapiel等[5]定量或半定量方法。 1．2．3 观察指标 1．2．3．1 肺组织与血清中HO．1活性测定 将肺