眼镜蛇神经毒素对小鼠脑内乙酰胆碱代谢的作用.PDF

维普资讯 ·8 · 中山压科大学学报 1990年萤 l鲞堕 塑 · 国际合作学术研究 · 眼镜蛇神经毒素对小鼠脑内 乙酰胆碱代谢的作用 陈汝筑 (葑理教研室 ) Susan E Robinson (美国弗 吉尼亚 医学院药理、毒理系 ) 提 蜜 本实验用放射气相色谱／质 潜联用技术，测定了瞄室注射眼镜蛇神经毒素 (CT，2 g／且) 后对小 鼠啮内大脑皮层、丘髓及下丘脑等融区的己酰胆碱 (ACh)、胆碱 (Ch)、KAC~t及 乙酰胆碱 更 新率 (TRACh) 的影响。结果显示，各脑区的 ACh、Ch 及 KACh均 无 显 著 变 化，但 下 丘 脑 的 TRACH 比对照组明显下降，提示下丘脑的胆碱髓神经元活动受到 CT 的抑制。 美■饲 眼镜蛇 神经毒素 己酰胆碱 更新率 小鼠脑 过去，对蛇毒中的q一毒索在神经肌接头的 分钟。注射完后，立即用聚束微波杀死小鼠。 毒理作甩已进行过详尽的研究，但有关它们的 迅速取出鼠脑并存予一7O℃。 中枢作用所知仍是十分模糊的。最近，有关眼 参照Slomick与Leonard的小鼠脯图谱，按 镜蛇神经毒素镇痛作用的研究提示其 申枢性镇 OCallaghan等人的方法 ，用显微解 剖 法， 痛作用，并可能涉及胆碱能系统[J。本文观察 从小鼠脑切片中取出顶额皮层、下丘瞄和丘癌 了脑室注射眼镜蛇神经毒素 (CT)对 小 鼠不 等脑区组织。标本保存于一70℃，直到进行 乙 同脑医乙酰胆碱代谢的影响。结果显 示CT能 酰胆碱 (ACh)和胆碱 (Ch)的测定。 选择性抑制小鼠下丘脑乙酰 胆 碱更 新，提示 ACh与 (Ih 的测定参照 Robinson的改良 CT对该脑区的胆碱能活动有抑制作用。 法 。每标本加入2．5nmol的 。H日一Ach和 一 ACh作为内标准。脑组织在 O．4M 高氯酸溶液 材 料 与 方 法 中匀浆。离心后，沉淀物保留作蛋白定量测定 (Lowny法 )。用7．5M 醋酸钾调整上清液的 实验用54只雄性 icr小鼠，体重25~3(}g。 pH至 4．4。再次离心，于上清液 中加 入 2 在恒温湿条件下饲养 每笼 5只 人工昼夜周 Reinecke盐溶液 ，使胆碱及其酯类成为Reinccke 期为12／12h 动物实验均在每天上午 9时至下 盐沉淀。亍离心后的沉淀物加入 5raM 甲苯葫 午 3时进行．M避免乙酰胆碱水平随昼夜周期 酸银溶液。室温离 心 10rain，加入丙酰氯使魍 波动的影响。 碱变为丙 酰胆 碱。再加苯硫赶酸 钠 (Sadium 小鼠脑室注射参照 Pedigo等人 的方法。 benzenthiolate)伎 ACh及雨酰胆碱去 甲基 。 在 甲氧氟烷 浅麻醉下．给小鼠右侧脑室注射生 再用 乙酸 乙酯抽 提。抽 提