综论传播性海绵状脑病致病物质普里昂(Prion)不活化方法及研究.PDF

綜論綜論傳播性海綿狀腦病傳播性海綿狀腦病致病物質普里昂致病物質普里昂 綜論綜論傳播性海綿狀腦病傳播性海綿狀腦病致病物質普里昂致病物質普里昂 (Prion)不活化方法及研究(Prion)不活化方法及研究 (Prion)(Prion)不活化方法及研究不活化方法及研究 李淑慧 、許偉誠 本所疫學研究組 前言前言 前言前言 傳播性海綿狀腦病(Transmissible spongiform encephalopathies, TSEs) ，因其會造成人 類或動物腦組織海綿狀病變而被命名 。1982 年美國神經生化學家 Prusiner S.B 於科學 (Science)雜誌發表羊搔癢症(scrapie)之致病物質為一不含核酸 ，僅具蛋白質之粒子，並將 其命名為proteinaceous infection particle ，此具感染力之病因簡稱prion(普里昂) 。正常動 物及人類許多細胞表面皆含有prion ，簡稱PrPC ，c 代表細胞(cellular) ；此PrPC 正常結構 為四個 α 螺旋結構 ，由於不明原因使其中兩個α 螺旋結構異構(conformation)為 β 褶 板樣結構 ，發生異構現象之prion 稱PrPSc ，Sc 代表scrapie ，具感染力與病原性。PrPSc 無 法被正常蛋白酵素所水解 ，故會堆疊於腦組織中，尤其是神經細胞，引起神經細胞凋零 (apoptosis) ，繼而星狀細胞移除凋零死亡之神經細胞，形成腦組織之空洞變化。TSEs 之 病原對傳統標準之消毒方法具有相當的抵抗力 ，完全有效的消毒方法有 ：132℃ 4.5 小時 之高壓滅菌法 、1M NaOH 浸泡合併 121℃ 90 分鐘之高壓滅菌法與濃度20,000 ppm 次氯 酸鈉溶液浸泡1 小時 。經formalin 固定之組織需用98% formic acid 加以處理 ，可將大部 分發生異構之Prion 不活化 。 PrionPrion 的定義的定義 PrionPrion 的定義的定義 prion 疾病是由新病原PrPSc 引起的，與已知的細菌及病毒顯著不同。例如其非常耐熱、 不易被生物分解 。純化病原後發現其主要為prion 蛋白 ，雖然對此傳染源的性質尚有爭 議，但大部分的實驗支持只有蛋白的假說 ，即此病原無核酸且只有細胞蛋白PrPC 的不 正常相似物 。在宿主中樞神經系統中，PrPC 轉變為不正常異構物 PrPSc 且累積下來 ，是 19 prion 疾病的特徵 。prion 位於細胞外表面 ，被phosphatidylinositol glycolipid 所支撐 ，可 能有訊息傳導 、細胞黏著或是一些傳遞功能。PrPC 在許多種細胞都有表現 ，包括神經細 胞、星狀細胞以及淋巴球。雖然PrPC 主要在腦組織中被發現 ，在心臟、骨骼肌以及腎臟 中也有許多，但在肝臟中則很少被偵測到。有幾種可能與PrPC 結合的蛋白質被報告過 。 其中之一是似類澱粉先質蛋白(amyloid precursor-like protein 1, APLP1) ，為類澱粉先質蛋 白基因族的成員之一。這引申了此病是否與老年癡呆症有關聯的新問題。其他可能的結 合蛋白是人類薄受體先質 (laminin receptor precursor ，一種細胞對感染源的表面受體) 以 及未分類的66kDa 膜蛋白 。PrPC 與Bcl-2 (一種可以救援神經細胞的蛋白質) 的相互關係 指向prion 蛋白可能與神經細胞的存活有關，但還未有任何生理學上明顯的證據 [9-13] 。 prion 是由在加州大學之Prusiner S.B 於1982 年發現 ，並因此於1997 年獲頒諾貝爾 獎 [10] 。Prusiner 認為這個有缺憾的突變prion 蛋白可「感染」腦部內健康的prion 蛋白 ， 造成其結構上的改變。結構異常的prion 蛋白會繼續聚集，進而影響正常的腦部功能，最 後會形成像海綿體狀的結構