片断流技术与流动注射技术的比较.DOC

片断流技术与流动注射技术的比较 连续流动分析技术分为两种方法： 片断流技术－——用空气气泡或氮气气泡将样品分开成一小段一小段。 流动注射技术－——没有空气气泡，利用扩散将样品和试剂混合。 虽然流动注射技术是后发展的技术，但实际上它在理论上不完善，应用上受到限制，特别是对于反应过程较为复杂或要求反应时间较长的化学参数测量具有致命的弱点，在准确度和稳定性、重复性上较片断流技术有很大的距离，其优点是造价成本便宜得多。下面分成八个部分来谈一谈片断流技术的优点。 第一：灵敏度高 有如下两个因素决定了片断流技术的灵敏度高。 ·试剂与样品完全反应。 ·测量最大浓度液体的吸光度。 如果延时是必须的，反应可以延时和加热，以达到反应完全。完全反应的优点是： 灵敏度达到最大， 细微的反应条件变化如流速、温度的细小变化不会影响灵敏度而流动注射则会有影响。 当方法灵敏度恒定时，结果会更长时间稳定于技术指标范围内，重新校准就无需象流动注射样那么频繁。 下表显示两种技术各自最长反应时间 片断流技术 流动注射 最长可能反应时间 20分钟 1分钟 最高可能反应温度 95℃ 60℃ 由于流动注射最长反应时间只有1分钟，很多反应是不能在1分钟内反应完全的，所以它更多地采用推算和比较。由于内部最高反应温度只有60℃，对于反应温度要求高于60℃的参数测量，它采用外接加热的方法，即将试剂在外面加热到一定温度再进入反应池，相对于片断流技术提供恒温槽来创造恒定反应条件来说，优劣非常清楚。流动注射采用这种方法是不得已而为之，它有如下几点明显会影响结果的稳定性： 环境温度会影响试剂的温度下降速率， 由于离开热源后温度会由于散热引起温度下降，真正与样品混合后，温度会急剧下降，反应条件很难控制。 以上两点可以说是随机的，换句话说其结果的重复性必然会很差。 下图是两种方法测量浓度的情况： 第二 在进入检测池时，样品浓度已经达到稳定的最大值，片断流的输出是一顶端因达到稳态而显得平直的线条。稳态代表浓度达到最大值，测量稳态的平均高度即可获得其吸光度，计算获得浓度值。 流动注射形成一尖峰，只是瞬时达到最大。 稳态从两个方面保证了最大灵敏度。 样品浓度在检测池中达到最大， 样品可保持处于最大值足够长时间，以保证获得准确的读数。 如下图所示： 第三 稳定性 片断流分析技术能够在很长时间给出稳定不变的结果，不会因为环境和条件的细微变化而有所波动，具体表现在如下几点： 即使是很慢的反应也可达到完全反应：不论是反应时间或温度的变化都不会影响方法的灵敏度和结果。 下图显示了在反应时间变化2％的时候，对片断流没有影响而流动注射的灵敏度会变化4.4%（反应时间变化2％是很正常的，泵随着工作时间增长，温度会升高，液体流速会下降） ②每一个结果是几个最大浓度值的平均值：干扰能很容易地被辩别出来，并被分离。片断流技术的吸收峰在最大浓度时能达到稳态，如下图所示在最大浓度处形成一平台，每一个液体样品片断都形成一个吸收峰，几个在最高峰的形成稳态的浓度的平均值就是最终结果。 ③反应模式不会影响结果 下图显示了当样品中含有不纯物质时反应速率的变化，它对片断流技术的结果没有影响，而对流动注射的影响是很明显的。因为标准物质是纯净的，而样品中有可能会有阻止或加速某种反应的物质，这样，流动注射就失去了比较计算结果的基础。 第四 复杂的反应过程也可自动完成 片断流技术能够自动完成比较复杂，因而需要很长时间反应的化学过程，如在线蒸馏、水解。只有片断流技术的紫外消化获得ISO认可，而流动注射受其理论的影响，只能在机体外进行这些复杂的过程，因此，操作自动化程度也必将大打折扣。 第五 非常容易判断系统工作是否正常 液体片断与气泡组成非常规则的图案，很容易辨别系统工作是否正常或辨别到问题的来源如试剂用完了或管路堵塞。 每一个片断的结果都储存在计算机中，所以能够重新显示查出错误根源，将每一个片断的浓度显示在计算机上，可检查最后结果是否正确。 第六 能去除脏样品中的干扰物质 透析膜只允许小体积离子或分子，穿过透析膜，大的，或有颜色的混合物，蛋白质、脂肪、悬浮物都将被泵泵到废水池中，而流动注射是没有这种功能的，它要求样品比较纯，或先过滤。 第七 气泡不会对系统产生干扰 样品或试剂溶解的空气释放会给系统带来不需要的气泡，但片断流技术需要与空气气泡一起工作，所以，不会影响系统工作，因为片断流技术测的是稳态的平均值，如下图所示。而流动注射则会有很多麻烦，表现在如下两个方面： 流动注射采用高速泵 因为直径只有0.8-1mm，气泡会影响液体的规则流动，这必然会对结果的重复性产生影响。 流动注射因为气泡影响而产生的吸收尖峰，不论其测量模式是面积或是高度都很难去除，这必然会影响结果的准确性。 第八 检测极限 片断流技术在最低检出限是一平台，保持几秒钟而