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生物化学试验教学大纲(农学-生命科学与工程学院.DOC
《生物化学实验》课程教学大纲
【课程编号【英文名称】Experiments of Biochemistry
【课程学时】24
【适用专业】农学
一、本实验课程的教学目的和要求
《生物化学实验》既是生物化学理论教学的辅助教程,也是一门重要的专业基础实验技术课程分子生物学学生1.在实验过程中生物化学的理论知识进一步验证、巩固、扩充和提高2.学会正确使用有关生化仪器3.培养学生在进行生物学实验时的实验过程、结果分析、实验设计和动手实验的能力,培养和提高学生的实验操作技能4.掌握包括蛋白质、核酸、酶、维生素、脂类和代谢各方面实验方法和技能,掌握离心、滴定、比色、层析、电泳等各种生物化学实验技术5.培养学生学习兴趣、重视实践、探索进取、吃苦耐劳、团结合作的精神。。
6.培养科研能力和科学素质,使学生具有严格的科学学风和发现、分析、解决问题的初步能力
本实验课程上承《无机化学实验》、《分析化学实验》和《有机化学实验》,下续《遗传学实验》、《植物生理学实验》、《微生物实验》、《分子生物学
三、实验课程理论教学内容安排(共安排4学时)
第一部分 生物学实验与化学实验的主要区别(0.5学时)
【目的要求
第一节 空白(对照)实验的含义
第二节 空白(对照)实验的设定
【教学重点】空白实验的意义。
【教学难点】设计空白实验。
第二部分 比色测定的方法与原理(2.5学时)
【目的要求
第一节 关键溶液的分析与配制;
第二节 比色过程的分析;
第三节 结果处理方法的选择;
【教学重点】实验结果的处理。
【教学难点】实验结果的数据分析。
第三部分 电泳的方法与原理(1.0学时)
【目的】
通过电泳实验的理论讲授,熟悉电泳的原理、电泳的结果分析和过程中的关键步骤。
【要求】
1、了解电泳的原理。
2、理解实验结果的分析。
3、掌握电泳过程中的关键步骤。
【教学内容】通过醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂凝胶电泳分离血清蛋白质,掌握电泳的方法与原理。
第一节 电泳材料的前期处理;
第二节 电泳过程中的关键步骤;
第三节 电泳结果的分析;
【教学重点】电泳的操作过程。
【教学难点】电泳过程中的关键步骤。
四、实验内容安排
1、实验项目的类型及性质
序号 实验名称 学时 类型 性质 验证 综合 设计 演示 必做 自选 1 糖原的提取与鉴定 3 √ √ 2 植物VC的提取与定量测定 3 √ √ 3 酶活性的测定 4 √ √ 4 比色法测植物总糖 6 √ √ 5 胆固醇含量的测定 3 √ √ 6 植物总蛋白的测定 6 √ √ 7 植物总脂的测定 6 √ √ 8 电泳分离蛋白质 6 √ √ 9 亲和层析分离乳酸脱氢酶 8 √ √ 实验学时数合计 45 42 0 3 0 21 24 实验项目数合计 9 8 0 1 0 4 5 2、实验项目说明
实验一、糖原的提取与鉴定
【目的】通过对糖原的提取,了解空白实验的意义,掌握糖原的性质。
【要求】验证肝糖原的提取方法和重要的鉴定特点。了解糖原的提取方法和分离措施。
【内容】肝糖原是糖在动物体内的重要贮存形式,在代谢过程中是体内糖的重要来源之一。其合成与分解对血糖的调节起重要作用。糖原是高分子化合物,分子量约400万,微溶解于水,无还原性,与碘作用生产红色物质。糖原的水解产物为葡萄糖,在碱性条件下可将Cu2+还原为红色的CuO。
【方法】乙醇提取法。
实验二、植物VC的提取与定量测定
【目的】通过对维生素C的提取和定量,掌握维生素C的提取方法,熟悉定量分析时空白(对照)实验的意义以及对照实验的设计方法。
【要求】了解维生素C的提取方法和定量测定方法,同时熟悉定量分析时空白(对照)实验的意义以及对照实验的设计方法。学会设计空白的操作和步骤。
【内容】维生素C广泛存在于植物中,其存在形式有还原型维生素C(抗坏血酸)和氧化型维生素C(脱氢抗坏血酸),新鲜的样品中以还原型维生素C含量最高。维生素C很不稳定,对碱、热、光、氧、金属离子等敏感,很容易遭到破坏。在中性和微酸性条件下稳定,因此实验中常用草酸、三氯乙酸、醋酸等来提取样品中的维生素C。
【方法】组织粉碎提取、研钵提取,碘指示,2,6-二氯酚靛酚
实验三、酶活性的测定
【目的】通过对酶活性的测定,掌握酶活性的测定原理,理解酶活力和比活性含义的意义
【要求】了解酶活性的测定原理,掌握脂肪酶、酯酶活性的测定方法。
【内容】酶与底物反应后,对底物或产物的测定来定量酶的活性。如脂肪酶水解脂肪,产生的脂肪酸可用标准的碱溶液进行滴定而测定脂肪酶的活力。酯酶可将乙酰-2,6-二氯酚靛酚水解为2,6-二氯酚靛酚,测定2,6-二氯酚靛酚的含量即可测出酯酶的活力。
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