水产论文4500字:娃娃鱼.docVIP

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  • 2017-08-05 发布于广东
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水产论文4500字:娃娃鱼.doc

  水产论文4500字:娃娃鱼 古典文学中常见论文这个词,当代,论文常用来指进行各个学术领域的研究和描述学术研究成果的文章,简称为论文。以下就是由编为您提供的水产论文4500字。 病毒培养及滴度测定 在多个T-25细胞培养瓶中接种EPC细胞,培养至汇合单层,弃去培养液,用无菌的Hanks液洗涤细胞1次,取细胞培养的GSIV病毒液,以感染复数(MultiplicityofInfection,MOI)为0.5的量接种病毒液于细胞培养瓶中,所接种的病毒液体积为1mL/瓶,加入适量的助感染剂Polybrene(终浓度10mu;g/mL),置于25℃培养箱中吸附1h,期间每20min轻轻往复倾斜培养瓶数次,以利于病毒均匀吸附。吸附完毕后吸弃病毒液,每瓶加入5mL细胞维持液(含2%(V/V)血清的MEM培养基),置于25℃培养箱中培养,逐日观察细胞病变情况。当细胞单层出现70%~80%细胞病变效应(Cytopathiceffect,CPE)时收获细胞培养物,-80℃室温条件下冻融2次,于4℃条件下4000r/min离心20min,收集病毒液上清,进行病毒滴度(TCID50/0.1mL)的测定,然后分装于冻存管中-80℃保存备用。病毒滴度测定在96孔微量培养板中进行,病毒液用不含血清的MEM培养基10倍梯度稀释,分别接种于已长满EPC细胞的96孔微量培养板中,每个稀释度设8个复孔,每孔100mu

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